Anticuerpo C policlonal de conejo anti-RAB31 para WB, IF/ICC, ELISA - Q13636

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de RAB31

• RAB31 codifica la proteína Rab-31 relacionada con Ras (también conocida como Rab-22B), una pequeña GTPasa perteneciente a la familia Rab de reguladores clave del tráfico intracelular de membranas. Referencias relacionadas: PMID:11784320
• RAB31 cicla entre una forma inactiva unida a GDP y una forma activa unida a GTP, reclutando efectores descendentes que impulsan la formación, transporte, anclaje y fusión de vesículas.
• Es necesario para la integridad estructural y la función normal del aparato de Golgi y la red trans-Golgi (TGN), y participa en la translocación de GLUT4 estimulada por insulina hacia la membrana plasmática.
• RAB31 media el tráfico del receptor de manosa-6-fosfato (M6PR) desde la TGN hacia los endosomas, y promueve la internalización del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) en los endosomas.
• En células inmunes, RAB31 contribuye a la maduración del fagosoma contra patógenos fagocitados como Staphylococcus aureus y Mycobacterium tuberculosis.
• La localización subcelular incluye el aparato de Golgi, la membrana de la red trans-Golgi, los endosomas tempranos y las membranas de los fagosomas, reflejando su comportamiento dinámico de ciclo en membranas.
• Se observa la mayor expresión en placenta y cerebro, con niveles más bajos en corazón y pulmón; es indetectable en hígado, músculo esquelético, riñón y páncreas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación y la prenilación (lipoproteína) que probablemente regulan la asociación con la membrana; la proteína se identifica en conjuntos de datos de proteómica.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la proteína recombinante de longitud completa (aa 1–195), lo que puede reconocer las conformaciones unidas a GDP y GTP; verifique la especificidad de unión bajo diferentes condiciones de nucleótidos si es necesario.
• Para la transferencia Western (Western blot, WB), considere cargar controles positivos apropiados de lisados de tejidos/células humanas, de ratón o de rata que se sepa que expresan RAB31 (p. ej., cerebro, placenta). Se espera una banda cercana a 22 kDa.
• En inmunofluorescencia/ICC (IF/ICC), debido a que RAB31 se localiza en compartimentos membranosos dinámicos, utilice una fijación suave (p. ej., 4% PFA) y realice una tinción conjunta con marcadores de orgánulos (TGN, endosomas tempranos) para confirmar la especificidad de la señal.
• Para ELISA, titule tanto el anticuerpo como el antígeno para determinar las concentraciones de trabajo óptimas; utilice una proteína o péptido recombinante de RAB31 como antígeno de recubrimiento.
• Dado que el anticuerpo es policlonal, se debe validar la consistencia entre lotes en el sistema de muestras relevante.

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