Anticuerpo policlonal de conejo anti-RAB5A para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P20339

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de RAB5A

• RAB5A (proteína Rab-5A relacionada con Ras) es una pequeña GTPasa y un regulador clave del tráfico de membranas intracelulares. Alterna entre estados inactivos unidos a GDP y estados activos unidos a GTP para controlar la formación, el movimiento y la fusión de vesículas. Referencias relacionadas: PMID:10818110, PMID:14617813, PMID:15378032
• Es esencial para la fusión de las membranas plasmáticas con los endosomas tempranos y para el tráfico endocítico temprano, incluida la endocitosis de EGF y transferrina. Referencias relacionadas: PMID:16086013, PMID:17562788
• RAB5A recluta EEA1 y RABEP1/Rabaptina-5 a los endosomas tempranos, promoviendo la fusión de las membranas endocíticas. Referencias relacionadas: PMID:16086013, PMID:17562788
• Contribuye a la extensión de los filopodios y es necesario para la liberación exosomal de SDCBP, CD63, PDCD6IP y sindecano. Referencias relacionadas: PMID:14978216, PMID:22660413
• RAB5A se localiza en la membrana celular, la membrana de los endosomas tempranos, los melanosomas, las vesículas citoplasmáticas, las ondulaciones de membrana y la membrana del fagosoma.
• Participa en el reclutamiento del complejo FERRY a los endosomas tempranos, conectándolos con los ARNm para su distribución intracelular. Referencias relacionadas: PMID:37267906
• Las modificaciones postraduccionales incluyen prenilación, fosforilación y glucosilación (por similitud); se une a GTP y magnesio y funciona como una hidrolasa.
• RAB5A regula la maduración de los fagosomas que contienen células apoptóticas, probablemente en una vía posterior a DYN2 y PIK3C3 (por similitud).

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la proteína RAB5A humana de longitud completa (aa 1-215), por lo que el anticuerpo puede reconocer tanto las conformaciones unidas a GDP como las unidas a GTP; tenga esto en cuenta al interpretar los estados de localización y actividad.
• Para Western blot (WB), el peso molecular esperado es de aproximadamente 24 kDa; valide la banda en su sistema de muestras específico e incluya los controles adecuados.
• En IHC-P e IF/ICC, los pasos de recuperación antigénica y permeabilización celular son críticos; optimice los protocolos para el tejido diana o la línea celular correspondiente.
• Se predice que el anticuerpo presenta reactividad cruzada con RAB5A de ratón y rata, pero se recomienda realizar una alineación de secuencias y una validación experimental en estas especies.
• Para aplicaciones de ELISA, considere utilizar el inmunógeno recombinante o la proteína purificada como control positivo.

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