Anticuerpo policlonal de conejo anti-RAB8A para WB, IF/ICC, ELISA - P61006

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de RAB8A

• RAB8A es una pequeña GTPasa que alterna entre conformaciones inactivas unidas a GDP y activas unidas a GTP, funcionando como regulador principal del tráfico de membranas intracelular, el transporte vesicular polarizado y la liberación de neurotransmisores.
• Promueve la transcitosis de PODXL hacia los sitios de iniciación de la membrana apical (AMIS), impulsando la formación de la superficie apical y la lumenogénesis en coordinación con RAB11A, el complejo exocisto y las proteínas de polaridad. Referencias relacionadas: PMID:20890297
• Controla la morfología compactada del aparato de Golgi, influyendo así en la organización del Golgi y el procesamiento de la carga. Referencias relacionadas: PMID:26209634
• Colabora con MYO5B y RAB11A para establecer la polarización de las células epiteliales, esencial para la arquitectura y la función de los tejidos. Referencias relacionadas: PMID:21282656
• Participa en el tráfico de membranas hacia el cilio primario y es necesaria para la ciliogénesis, con implicaciones para la señalización y el desarrollo. Referencias relacionadas: PMID:21844891 PMID:30398148 PMID:20631154
• Desempeña un papel en la autofagia, contribuyendo al secuestro y la degradación de componentes citoplasmáticos. Referencias relacionadas: PMID:27103069
• Ante el estrés lisosomal, RAB8A es reclutada y estabilizada mediante fosforilación mediada por LRRK2, suprimiendo el aumento del tamaño lisosomal inducido por el estrés a través de los efectores EHBP1/EHNP1L1. Referencias relacionadas: PMID:30209220
• Presenta una amplia localización subcelular, que incluye la membrana plasmática, el Golgi, los endosomas, los endosomas de reciclaje, el cilio, los fagosomas, el centrosoma, el cuerpo medio y los lisosomas, lo que refleja sus versátiles funciones en el tráfico celular.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 140–207 de RAB8A humano (NP_005361.2), una región que probablemente genere anticuerpos capaces de reconocer tanto la proteína de longitud completa como posiblemente variantes de corte y empalme; verifique la especificidad mediante controles relevantes, como lisados sometidos a silenciamiento con siRNA o procedentes de un knockout.
• Para Western blot (WB), se espera una banda de aproximadamente 24 kDa según el peso molecular calculado; utilice un gel de SDS-PAGE con un porcentaje adecuado para proteínas de bajo peso molecular y considere la sobreexpresión o el enriquecimiento para señales endógenas débiles.
• Para inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), se esperan patrones de tinción compatibles con la localización multifacética de RAB8A, incluidos vesículas citoplasmáticas, Golgi, membrana plasmática y cilios; valide la colocalización con marcadores de orgánulos.
• Para ELISA, asegúrese de recubrir adecuadamente el inmunógeno recombinante o la proteína nativa procedente de lisados celulares o tisulares, y realice una titulación para optimizar la relación señal-ruido.
• Se especifica reactividad cruzada con RAB8A de ratón y de rata; sin embargo, debe confirmarse la conservación del epítopo si se trabaja con otras especies o con miembros estrechamente relacionados de la familia RAB, como RAB10 y RAB13.

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