Anticuerpo Policlonal Anti-RABGAP1 para WB, IHC-P, ELISA - Q9Y3P9

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RABGAP1

• RABGAP1, también conocida como proteína activadora de GTPasas Rab 1, GAPCenA (proteína asociada a GAP y centrosoma) o TBC1D11, actúa como una proteína activadora de GTPasas (GAP) para RAB6A, promoviendo la hidrólisis de GTP para regular el tráfico mediado por Rab y la señalización.
• Desempeña un papel en la nucleación de microtúbulos en el centrosoma y está implicada en la transición de metafase a anafase durante la división celular, vinculando el tráfico de membranas con el control del ciclo celular.
• RABGAP1 contiene un dominio TBC (Tre-2/Bub2/Cdc16) característico de RabGAPs, junto con regiones de hélice supercoiled (coiled-coil) que pueden facilitar las interacciones proteína-proteína y la dirigencia al centrosoma.
• La localización es predominantemente citoplasmática, con enriquecimiento en el centrosoma y dentro del citosol, según lo indicado por estudios de fraccionamiento subcelular e inmunofluorescencia.
• La proteína sufre splicing alternativo, produciendo múltiples isoformas, y está regulada por fosforilación, según lo evidenciado por datos de proteómica y la presencia de sitios de fosforilación en bases de datos.
• El peso molecular es de aproximadamente 122 kDa (calculado ~121,7 kDa); el anticuerpo reconoce una banda cercana a este tamaño en la transferencia Western (Western blotting) de lisados apropiados.
• RABGAP1 se ha identificado en cribados proteómicos de alto rendimiento, confirmando su expresión en varios tejidos humanos y su asociación con el proteoma del centrosoma.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno se diseñó contra una región C-terminal (aa 830-1069) de RABGAP1 humano, que abarca parte del dominio de hélice supercoiled y puede incluir regiones críticas para la actividad GAP; por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer epítopos funcionales.
• Para la transferencia Western (Western blotting), use condiciones reductoras estándar y cargue de 20 a 50 µg de lisado de células enteras; la banda predicha está a 122 kDa, y la reactividad cruzada con ratón permite el análisis en líneas celulares comunes como NIH/3T3 o MEFs.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), se recomienda la recuperación de antígeno utilizando tampón de citrato o EDTA; optimice la dilución del anticuerpo (p. ej., 1:50–1:200) e incluya controles negativos apropiados para confirmar la especificidad.
• Para ELISA, el anticuerpo puede usarse como reactivo de captura o detección; se aconsejan titulaciones preliminares en tablero de ajedrez (checkerboard) para determinar las concentraciones óptimas de recubrimiento y de anticuerpo.
• Dado que RABGAP1 es una proteína de baja abundancia involucrada en la regulación del ciclo celular, considere sincronizar las células para enriquecer células en metafase si evalúa la localización en el centrosoma o cambios en la expresión dependientes del ciclo celular.

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