Anticuerpo Policlonal Anti-Rad50 para WB, IHC-P, ELISA - Q92878

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Rad50

• RAD50 es un componente del complejo MRN (junto con MRE11 y NBN), que juega un papel central en la reparación de roturas de doble cadena (DSB), la recombinación de ADN y el mantenimiento de la integridad de los telómeros (PubMed:15064416, PubMed:21757780, PubMed:27889449). Referencias relacionadas: PMID:15064416 PMID:21757780 PMID:27889449
• El complejo MRN es esencial para la reparación de roturas de doble cadena de ADN mediante recombinación homóloga (HR), un mecanismo libre de errores que ocurre principalmente durante las fases S y G2 (PubMed:15064416, PubMed:21757780). Referencias relacionadas: PMID:15064416 PMID:21757780
• RAD50 contribuye a la resección de extremos de ADN uniéndose a los extremos del ADN y regulando las actividades exonucleasa/endonucleasa de MRE11; la unión de ATP induce un cambio conformacional que controla la accesibilidad de la nucleasa MRE11 (PubMed:11741547, PubMed:12805565, PubMed:28134932). Referencias relacionadas: PMID:11741547 PMID:12805565 PMID:28134932
• El complejo MRN también media la señalización del daño del ADN activando las quinasas ATM y ATR, una función independiente de la actividad nucleasa de MRE11 (PubMed:15064416, PubMed:15790808, PubMed:16622404). Referencias relacionadas: PMID:15064416 PMID:15790808 PMID:16622404
• RAD50 se localiza en el núcleo y se encuentra en los telómeros de los cromosomas donde puede modular la formación de t-loops (PubMed:10888888). Referencias relacionadas: PMID:10888888
• La expresión de RAD50 es muy baja en la mayoría de los tejidos, observándose niveles más altos en testículos y fibroblastos.
• RAD50 está sujeto a modificaciones postraduccionales que incluyen acetilación y fosforilación, y presenta dominios de unión a ATP, de hélice superenrollada (coiled-coil) y de unión a zinc (palabras clave de UniProt).
• El complejo MRN también procesa R-loops, contribuyendo a la estabilidad genómica (PubMed:31537797). Referencias relacionadas: PMID:31537797

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 1-270) de RAD50 humano; por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca el extremo N-terminal de la proteína.
• Para western blot (WB), RAD50 migra a ~154 kDa; asegure condiciones adecuadas de separación por SDS-PAGE y transferencia (por ejemplo, tiempos de transferencia extendidos) para proteínas de alto peso molecular.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), valide la tinción en muestras de testículo humano o fibroblastos, que exhiben una mayor expresión de RAD50; considere la optimización de la recuperación antigénica.
• Para ELISA, el inmunógeno de péptido sintético puede servir como control positivo para confirmar la reactividad del anticuerpo; el rendimiento con la proteína endógena de longitud completa debe validarse de forma independiente.
• Dado el papel central de RAD50 en la reparación del ADN y la biología de los telómeros, este anticuerpo puede ser útil en ensayos de inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) o de focos de daño en el ADN, aunque tales aplicaciones no han sido validadas con este producto y requieren optimización por parte del usuario.

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