Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-RAD50 para WB, ELISA - Q92878

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RAD50

• RAD50 (proteína de reparación del ADN RAD50), también conocida como NBSLD o hRad50, es un componente central del complejo MRN (MRE11-RAD50-NBN) que orquesta las respuestas celulares a las roturas de doble hebra del ADN.
• El complejo MRN es esencial para la reparación de roturas de doble hebra mediante recombinación homóloga, donde media la resección de los extremos del ADN para generar ADN de cadena simple necesario para la invasión de cadenas.
  Referencias relacionadas:
  PMID:15064416
  PMID:21757780
  PMID:27889449
• RAD50 se une y ancla los extremos del ADN, y su cambio estructural dependiente de ATP controla la actividad de la nucleasa MRE11, posicionando los sustratos de ADN para su escisión.
  Referencias relacionadas:
  PMID:11741547
  PMID:12805565
  PMID:28134932
• Más allá de la resección de extremos, el complejo MRN activa las quinasas ATM y ATR para transducir señales de daño del ADN, una función independiente de la actividad de la nucleasa MRE11.
  Referencias relacionadas:
  PMID:15064416
  PMID:15790808
  PMID:16622404
• En los telómeros, el complejo MRN modula la formación del bucle T (t-loop), contribuyendo a la integridad y regulación de la longitud de los telómeros.
  Referencias relacionadas:
  PMID:10888888
• RAD50 también está implicado en el procesamiento de bucles R (R-loops), resolviendo conflictos transcripción-replicación para mantener la estabilidad genómica.
  Referencias relacionadas:
  PMID:31537797
• A nivel subcelular, RAD50 se localiza principalmente en el núcleo, asociándose con la cromatina y los telómeros.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación, que pueden regular su actividad e interacciones en respuesta al daño del ADN.
• La expresión tisular es generalmente baja, con un enriquecimiento notable en los testículos y niveles detectables en fibroblastos.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido C-terminal (aa 1200-1300) fuera de los dominios conservados de la ATPasa y de la hélice enrollada (coiled-coil); considere verificar la especificidad mediante controles de knockdown o knockout en los tipos de muestras relevantes.
• Para Western blot, RAD50 migra aproximadamente a 154 kDa; utilice un porcentaje de gel adecuado (por ejemplo, gel de resolución al 6%) y asegure una transferencia eficiente de esta proteína grande (por ejemplo, tiempos prolongados de transferencia húmeda).
• Se informa que el anticuerpo reacciona con RAD50 humano, de ratón y de rata; la reactividad cruzada con la proteína endógena en estas especies debe validarse bajo sus condiciones experimentales.
• En aplicaciones de ELISA, las condiciones óptimas de recubrimiento y los rangos de detección deben determinarse empíricamente utilizando el péptido inmunógeno o la proteína recombinante de longitud completa como estándar.

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