Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Rad50 para WB, IHC-P, IP, ELISA - Q92878

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RAD50

• RAD50 es un componente central del complejo MRN (MRE11-RAD50-NBS1) y desempeña un papel fundamental en la reparación de roturas de doble hebra de ADN, la recombinación homóloga, la integridad de los telómeros y la meiosis.
  Referencias relacionadas: PMID:15064416, PMID:21757780, PMID:27889449
• El complejo MRN media la resección de extremos de ADN, generando ADN de hebra simple crítico para la recombinación homóloga, y facilita el reclutamiento de factores de reparación y la activación de las quinasas ATM/ATR después del daño en el ADN.
  Referencias relacionadas: PMID:15064416, PMID:27889449, PMID:28867292, PMID:15790808, PMID:16622404
• El complejo posee actividades de endonucleasa de hebra simple y exonucleasa de doble hebra 3′-5′ (proporcionadas por MRE11), mientras que RAD50 se une y ancla los extremos de ADN para regular la actividad de MRE11.
  Referencias relacionadas: PMID:11741547, PMID:9590181, PMID:9651580, PMID:12805565, PMID:28134932
• RAD50 contiene dominios de unión a ATP; la unión de ATP induce una conformación cerrada que posiciona óptimamente los extremos de ADN dentro del sitio activo de MRE11 (por similitud).
• RAD50 es predominantemente nuclear, localizándose en los telómeros de los cromosomas y en los sitios de daño del ADN; también participa en el procesamiento de bucles R y en la modulación de la formación de bucles t.
  Referencias relacionadas: PMID:10888888, PMID:31537797
• RAD50 se expresa a niveles bajos en la mayoría de los tejidos, con una expresión elevada en testículos y fibroblastos.
• RAD50 está sujeto a acetilación y fosforilación, y se caracteriza por motivos de unión a ATP, hélice superenrollada (coiled-coil), unión a zinc e hidrolasa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para el análisis de Western blot, espere una banda cercana a 154 kDa. Use un control positivo de lisado apropiado de células humanas, de ratón o de rata e incluya un control de carga.
• Para IHC-P en secciones incluidas en parafina, pueden considerarse métodos estándar de recuperación de antígenos (p. ej., recuperación de epítopos inducida por calor); se recomiendan experimentos piloto.
• Para inmunoprecipitación (IP), use protocolos estándar con pasos de preclarificación; el anticuerpo es adecuado para aislar complejos de RAD50 endógeno de extractos nucleares.
• Para ELISA, el inmunógeno peptídico (residuos N-terminales 1-100) puede usarse para validar el título del anticuerpo; la reactividad cruzada con proteínas relacionadas debe descartarse mediante alineación de secuencias.
• Debido a su reactividad entre especies, este anticuerpo puede emplearse para estudios comparativos en modelos de reparación del ADN humano, de ratón y de rata.

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