Anticuerpo policlonal de conejo anti-Raf1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04049

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de Raf1

• RAF1 (también conocido como c-Raf, Raf-1) es una serina/treonina-proteína quinasa que actúa como un vínculo fundamental entre las GTPasas Ras asociadas a la membrana y la cascada MAPK/ERK, regulando la proliferación, diferenciación, apoptosis y supervivencia celular.
• La activación de RAF1 inicia una cascada de fosforilación a través de MEK1/2 y ERK1/2, controlando en última instancia la transcripción de genes implicados en la progresión del ciclo celular y la transformación celular.
• RAF1 fosforila múltiples dianas posteriores, incluidas BAD (en Ser-75), las adenilil ciclasas (ADCY2, ADCY5, ADCY6) y PPP1R12A, TNNT2, y modula la señalización de NF-kB, la motilidad, la apoptosis, la proliferación y la angiogénesis.
• Localización subcelular: RAF1 se encuentra en el citoplasma, la membrana celular, las mitocondrias y el núcleo; su translocación a las mitocondrias media efectos antiapoptóticos mediante la unión a BCL2.
• Especificidad tisular: En el músculo esquelético, la isoforma 1 es más abundante que la isoforma 2.
• Modificaciones postraduccionales: RAF1 experimenta fosforilación en Ser-338 y Ser-339 por PAK1, y está sujeto a metilación, unión a metales (zinc) y corte y empalme alternativo, lo que da lugar a múltiples isoformas.
• Enfermedades asociadas: Las mutaciones y la desregulación de RAF1 están relacionadas con cardiomiopatías (CMD1NN) y sordera, lo que subraya su función en diversos procesos fisiológicos.
• Funciones biológicas clave: Actúa como protooncogén, regulando la cicatrización de heridas, la transformación de células epiteliales y la supresión de la apoptosis.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Para la transferencia Western, el anticuerpo detecta una banda de aproximadamente 73 kDa. Se recomiendan controles positivos, como lisados de células HeLa, HEK293 o Jurkat.
• En inmunohistoquímica, puede ser necesaria la recuperación antigénica; considere probar métodos tanto inducidos por calor como enzimáticos en tejidos incluidos en parafina.
• Para inmunofluorescencia, incluya la permeabilización con Triton X-100 y utilice anticuerpos secundarios adecuados; tenga en cuenta que Raf1 se localiza en el citoplasma, la membrana y el núcleo.
• El inmunógeno abarca los aminoácidos 190-350, por lo que puede reconocer múltiples isoformas de Raf1; se recomienda la validación en las especies pertinentes (humana, ratón y rata).
• Al tratarse de un anticuerpo policlonal, puede producirse variabilidad entre lotes; verifique el rendimiento en el ensayo previsto utilizando controles adecuados.

CamelBio: su puente integral de abastecimiento

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