Anticuerpo monoclonal Anti-RALBP1 para IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15311

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de RALBP1

• RALBP1, también conocido como RLIP76 o proteína 1 de interacción con Ral, es una proteína multifuncional de aproximadamente 76 kDa codificada por el gen RALBP1 (GeneID: 10928).
• Actúa como efector descendente de RALA y RALB, y funciona como proteína GTPasa activadora (GAP) que inactiva a CDC42 y RAC1 al estimular su actividad GTPasa intrínseca. Referencias relacionadas: PMID:7673236
• Participa en la regulación dependiente de la señalización de Ral de la endocitosis mediada por receptor, incluida la internalización dependiente de ligando de los receptores de EGF e insulina. Referencias relacionadas: PMID:10910768, PMID:12775724
• Durante la mitosis, actúa de andamiaje para la fosforilación de EPSIN/EPN1 mediada por ciclin B-CDK1, inhibiendo la endocitosis; también facilita la fisión mitocondrial al actuar de andamiaje para la fosforilación de DNM1L en las mitocondrias. Referencias relacionadas: PMID:12775724, PMID:21822277
• Posee actividad de transporte dependiente de ATP para conjugados de glutatión y xenobióticos como la doxorubicina, lo que puede contribuir a la resistencia a múltiples fármacos en células cancerosas.
• Subcelularmente, se localiza en múltiples compartimentos: membrana celular, citosol, citoesqueleto (polo del huso mitótico), núcleo y mitocondria.
• Se expresa de forma ubicua a niveles bajos, con una expresión notablemente fuerte en eritrocitos.
• Se modifica postraduccionalmente por acetilación y fosforilación; está clasificado en palabras clave como unión a ATP, activación de GTPasa y translocasa.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 200–300; hay que tener en cuenta que el epítopo puede estar parcialmente oculto en la conformación nativa, por lo que puede requerir desnaturalización o una recuperación de antígeno adecuada para inmunohistoquímica.
• Para IHC-P, se recomienda la recuperación de epítopos inducida por calor estándar (por ejemplo, tampón de citrato pH 6.0) y una concentración de anticuerpo primario optimizada; validar en especies con reactividad cruzada confirmada (humano, ratón, rata).
• En IF/ICC, la permeabilización con 0.1–0.3% de Triton X-100 puede mejorar la accesibilidad al antígeno nuclear o mitocondrial; incluir controles negativos adecuados.
• Las aplicaciones de ELISA se benefician de la titulación del anticuerpo contra el péptido inmunógeno o la proteína RALBP1 recombinante para establecer la concentración de recubrimiento y el rango de detección óptimos.

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