Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-RALGPS1 para WB y ELISA - Q5JS13

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RALGPS1

• Codifica un factor de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF) que activa específicamente la pequeña GTPasa RALA catalizando el intercambio de GDP/GTP, regulando así las cascadas de señalización descendentes.
• También conocido como RalGEF2 y RalGPS1A; la proteína contiene un dominio PH y un motivo de unión a SH3, característicos de los miembros de la familia RalGEF, que facilitan la orientación a la membrana y las interacciones proteína-proteína.
• El gen RALGPS1 sufre splicing alternativo, produciendo al menos dos isoformas principales con patrones de distribución tisular distintos.
• La isoforma 1 se expresa prominentemente en el corazón y los testículos, con niveles más bajos en el cerebro, páncreas, músculo esquelético, intestino delgado y timo; la isoforma 2 se expresa más ampliamente en el cerebro, colon, riñón, páncreas, próstata, músculo esquelético, intestino delgado, testículos, timo y útero.
• Los estudios de localización subcelular muestran que RALGPS1 está presente tanto en el citoplasma como en la membrana celular, lo cual es consistente con su papel en la regulación espacial de la señalización de RALA.
• Posiblemente involucrado en la organización del citoesqueleto, lo que sugiere una función en la forma celular, motilidad o tráfico intracelular (por similitud).
• Los estudios estructurales (estructura 3D) han proporcionado información sobre el mecanismo catalítico del dominio Sec7, subrayando su importancia como factor liberador de nucleótidos de guanina.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 1–300 de RALGPS1 humano (NP_055451.1), una región que puede conservarse entre isoformas; por lo tanto, el anticuerpo puede detectar múltiples variantes de splicing. Considere el bloqueo con péptidos o controles específicos de isoforma para confirmar la especificidad.
• Para western blot, RALGPS1 endógeno migra aproximadamente a 62 kDa. Asegure una lisis celular completa y considere protocolos de enriquecimiento de proteínas de membrana, ya que la proteína se asocia con la membrana plasmática.
• Al realizar ELISA, utilice una curva estándar generada con el fragmento de inmunógeno recombinante para la estimación cuantitativa y valide el ensayo usando lisados de células o tejidos humanos.
• Dada la amplia expresión tisular, valide el anticuerpo en un panel de tejidos humanos (p. ej., corazón, testículos, cerebro) para confirmar el patrón de bandas esperado.
• Dado que RALGPS1 es un GEF, los experimentos de coinmunoprecipitación pueden acoplarse con WB para estudiar su interacción con RALA; sin embargo, se recomienda la optimización empírica de los tampones de lisis.

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