Anticuerpo policlonal de conejo Anti-RANKL para WB, IF/ICC, ELISA - O14788

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de RANKL (TNFSF11)

• RANKL ( Ligando del activador del receptor del factor nuclear kappa-B), también denominado TNFSF11, ODF, OPGL y TRANCE, es una proteína transmembranal de tipo II perteneciente a la superfamilia de ligandos del factor de necrosis tumoral (TNF).
• Como citoquina, es un regulador principal de la diferenciación y activación de osteoclastos al unirse a su receptor RANK (TNFRSF11A) y al receptor señuelo OPG (TNFRSF11B), controlando así la remodelación ósea.
• RANKL aumenta la capacidad de las células dendríticas para estimular la proliferación de linfocitos T vírgenes y está implicado en la regulación de las interacciones entre linfocitos T y células dendríticas, lo que sugiere un papel en la inmunidad adaptativa.
• Promueve la reabsorción ósea patológica en la hipercalcemia humoral de malignidad, lo que subraya su importancia en la enfermedad ósea asociada al cáncer. Referencias relacionadas: PMID:22664871
• RANKL desencadena la osteoclastogénesis a través de cascadas de señalización que generan oscilaciones sostenidas de Ca2+ intracelular, lo que lleva a la activación de NFATC1, la translocación nuclear y la inducción de la transcripción de genes específicos de osteoclastos.
• La proteína se localiza en la membrana celular y el citoplasma, y puede secretarse en forma soluble (sRANKL) mediante empalme alternativo o escisión proteolítica.
• La expresión más alta se encuentra en los ganglios linfáticos periféricos, con niveles de moderados a bajos en bazo, leucocitos de sangre periférica, médula ósea, corazón, placenta, músculo esquelético, estómago y tiroides.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación N-ligada, y la molécula existe en isoformas ancladas a la membrana y solubles, reguladas por empalme alternativo y escisión.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 78–317 de RANKL humano, que incluye el dominio de homología al TNF extracelular; por lo tanto, se espera que este anticuerpo detecte tanto las formas unidas a la membrana como la soluble (sRANKL).
• Para transferencia Western, se recomienda utilizar lisados de tejidos con alta expresión de RANKL, como ganglios linfáticos o linfocitos T activados, y validar en condiciones reductoras para observar la banda de ~35 kDa.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, puede ser necesaria una permeabilización adecuada para la detección citoplasmática; los estudios de colocalización con marcadores de membrana pueden ayudar a confirmar la distribución subcelular.
• Para ELISA, este anticuerpo puede ser adecuado como reactivo de captura o detección para cuantificar sRANKL en sobrenadantes de cultivo celular o fluidos biológicos; realice siempre una validación cruzada con una curva patrón caracterizada en su matriz específica.
• Se ha registrado reactividad cruzada con ratón y rata; sin embargo, las diluciones de trabajo óptimas y la validación específica por especie deben realizarse de forma empírica en el sistema de muestra correspondiente.

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