Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-RASSF1 para WB y ELISA - Q9NS23

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RASSF1

• RASSF1 es un potencial supresor tumoral necesario para la apoptosis dependiente de receptores de muerte. Media la activación de STK3/MST2 y STK4/MST1 durante la apoptosis inducida por Fas al prevenir su desfosforilación.
• Al asociarse con MOAP1, RASSF1 promueve el cambio conformacional de BAX y su translocación a las membranas mitocondriales en respuesta a la estimulación por TNF y TNFSF10.
• La isoforma A interactúa con CDC20, un activador del complejo promotor de la anafase (APC), inhibiendo la actividad del APC y la progresión mitótica. También inhibe la proliferación regulando la acumulación de ciclina D1 en la transición de fase G1/S.
• La isoforma A interrumpe la interacción MDM2-DAXX-USP7, promoviendo la auto-ubiquitinación de MDM2 y contribuyendo a una activación eficiente de TP53 en el control del punto de control del ciclo celular tras el daño en el ADN.
• La proteína se localiza en el citoplasma, citoesqueleto (incluyendo microtúbulos, centrosoma, huso y polo del huso) y el núcleo.
• Las isoformas A y C se expresan ubicuamente en todos los tejidos probados, pero la isoforma A frecuentemente está ausente en líneas celulares cancerosas. La isoforma B se expresa principalmente en células hematopoyéticas.
• Las modificaciones post-traduccionales clave incluyen acetilación, metilación y fosforilación. La proteína contiene un dominio dedo de zinc y une zinc.
• El splicing alternativo y el uso de promotores alternativos producen múltiples isoformas, y el gen está sujeto a silenciamiento epigenético en muchos cánceres.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 101-340 del RASSF1 humano (isoforma A), abarcando dominios funcionales críticos. Considere verificar la especificidad de la isoforma usando controles positivos que expresen variantes conocidas de RASSF1.
• Para el análisis de Western blot, los lisados celulares totales de tejidos/líneas celulares humanas o de ratón que expresen RASSF1 deberían producir una banda cercana a 39 kDa. Tenga en cuenta que las modificaciones post-traduccionales pueden causar ligeras variaciones en la movilidad.
• En ELISA, el uso de la proteína recombinante o el péptido derivado de la región del inmunógeno como antígeno de recubrimiento puede ayudar a confirmar el reconocimiento del anticuerpo. Valide las condiciones del ensayo con controles positivos y negativos apropiados.
• Dado que RASSF1 frecuentemente se silencia por metilación del promotor en el cáncer, el tratamiento con agentes desmetilantes (ej. 5-aza-2'-desoxicitidina) antes de la preparación del lisado puede ser necesario para la detección en ciertas líneas celulares.
• Se ha demostrado que este anticuerpo reacciona con muestras humanas y de ratón; la reactividad cruzada con otras especies debe determinarse empíricamente.

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