Anticuerpo Monoclonal Anti-RB para IHC-P y ELISA - P06400

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RB

• La proteína asociada al retinoblastoma (RB, también conocida como p105-Rb, p110-RB1, pRb, pp110) es un supresor de tumores codificado por el gen RB1 que actúa como un regulador clave de la transición del ciclo celular G1/S. Referencias relacionadas: PMID:10499802
• En su estado hipofosforilado, RB se une a los factores de transcripción E2F, bloquea físicamente su dominio de transactivación y recluta enzimas modificadoras de cromatina para reprimir la transcripción de genes sensibles a E2F, evitando así la entrada en fase S. Referencias relacionadas: PMID:10499802
• La fosforilación de RB dependiente de ciclina y CDK induce su disociación de los E2F, activando la transcripción de genes diana de E2F y desencadenando la progresión del ciclo celular. Además, la fosforilación mediada por CDK3/ciclina-C promueve la transición G0-G1. Referencias relacionadas: PMID:10499802 PMID:15084261
• RB contribuye a la formación de heterocromatina y al mantenimiento de la estructura general de la cromatina al reclutar metiltransferasas de histonas como SUV39H1, KMT5B y KMT5C, que catalizan la trimetilación de la Lys-20 de la histona H4, lo que conduce a una represión transcripcional epigenética.
• La proteína se localiza predominantemente en el núcleo, pero también se puede detectar en el citoplasma. Su actividad está modulada por múltiples modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación y metilación.
• RB se expresa en la retina y se ha detectado a nivel de proteína en queratinocitos de prepucio. Referencias relacionadas: PMID:20940255
• En el contexto de infección viral, RB es objetivo de oncoproteínas como el antígeno T grande de SV40, HPV E7 y adenovirus E1A, que interrumpen el complejo RB-E2F1 e inactivan su función de supresor de tumores.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre la región C-terminal (aa 701-928) de RB humana, por lo que el anticuerpo probablemente reconoce epítopos dentro de este dominio. Considere su uso para detectar RB de longitud completa y cualquier isoforma que contenga la región C-terminal.
• Para IHC-P, los métodos estándar de recuperación de antígenos (p. ej., recuperación de epítopos inducida por calor en tampón de citrato, pH 6,0) pueden ser adecuados; sin embargo, se recomienda la optimización para cada tipo de tejido.
• Para ELISA, se puede explorar el emparejamiento con un anticuerpo de captura o el uso de recubrimiento directo con el inmunógeno recombinante. Valide el rendimiento en la matriz de muestras relevante.
• El anticuerpo presenta reactividad cruzada con RB humana; la reactividad con otras especies no ha sido probada y debe verificarse experimentalmente si es necesario.

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