Anticuerpo policlonal de conejo Anti-REST/NRSF para IF/ICC, ELISA - Q13127

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de REST/NRSF

• REST/NRSF, también conocido como factor de transcripción silenciador RE1 o factor silenciador neurorrestrictivo, es un represor transcripcional que se une a los elementos silenciadores neurorrestrictivos (NRSE) para silenciar genes neuronales en células no neuronales. Recluta los correpresores SIN3A y RCOR1, que a su vez atraen desacetilasas de histonas para modificar la cromatina y mantener la represión. Referencias relacionadas: PMID:11741002, PMID:11779185, PMID:12399542, PMID:10449787, PMID:10734093
• REST recluta el complejo BHC para la desacetilación y desmetilación de histonas, y puede formar un complejo represor con CDYL y la histona metiltransferasa EHMT2, que está implicado en la supresión de la transformación celular. Referencias relacionadas: PMID:19061646
• La isoforma 3 (una variante de empalme más corta) presenta una actividad represora más débil y puede formar heterodímeros con REST de longitud completa, inhibiendo su unión al ADN y el reclutamiento de correpresores, desreprimiendo así los genes diana. Este cambio de isoforma es crucial para la audición y la activación de genes neuronales. Referencias relacionadas: PMID:11779185, PMID:11741002
• REST mantiene el estado quiescente de las células madre neurales adultas mediante la represión de genes neuronales; su disociación de los sitios NRSE permite la diferenciación a neuronas maduras. Referencias relacionadas: PMID:21258371
• Durante el desarrollo postnatal, REST reprime la expresión de GRIN2B, facilitando un cambio en la composición de subunidades del receptor NMDA sináptico de GRIN2B a GRIN2A (Por similitud).
• En condiciones de hipoxia, REST actúa como un represor clave al unirse directamente a los sitios RE1/NRSE en los promotores de genes sensibles al oxígeno. Referencias relacionadas: PMID:27531581
• REST puede conferir resistencia al estrés en el cerebro envejecido mediante la regulación de genes implicados en la muerte celular y las respuestas al estrés. Referencias relacionadas: PMID:24670762
• En cáncer de mama, REST regula negativamente la expresión de SRRM3, y la pérdida de REST se correlaciona con un aumento de la invasividad. Referencias relacionadas: PMID:26053433
• Se expresa de forma ubicua, con niveles más altos en tejidos linfoides; en las neuronas de la corteza prefrontal y el hipocampo, el REST nuclear disminuye en la enfermedad de Alzheimer, la demencia frontotemporal y la enfermedad de Parkinson, a menudo se desplaza incorrectamente a los cuerpos de Lewy. Referencias relacionadas: PMID:24670762, PMID:30684677, PMID:21258371, PMID:26053433, PMID:8568247
• REST se localiza tanto en el núcleo como en el citoplasma, contiene nueve motivos de dedos de zinc de tipo C2H2 y está regulado por fosforilación y ubiquitinación.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (residuos 760–1060) se encuentra dentro de la región C-terminal de REST de longitud completa (isoforma 1). Se espera que este anticuerpo reconozca la isoforma 1; es posible que no detecte la isoforma 3 más corta. Valide la reactividad en el sistema de muestra correspondiente.
• Para IF/ICC, optimice las condiciones de fijación y permeabilización. La tinción nuclear debe ser predominante, pero se puede observar señal citoplasmática bajo ciertas condiciones.
• Elija modelos celulares adecuados: las líneas no neuronales (por ejemplo, HEK293, HeLa) expresan REST, mientras que las neuronas maduras suelen mostrar una expresión baja o nula. Utilice el silenciamiento por siARN o el bloqueo con péptido para confirmar la especificidad.
• Para ELISA, la secuencia del inmunógeno o el REST recombinante de longitud completa puede servir como estándar o péptido de bloqueo. Considere tanto los formatos de ensayo directos como indirectos.
• Como anticuerpo policlonal, verifique la consistencia entre lotes al cambiar de lote para experimentos críticos.

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