Anticuerpo monoclonal anti-Ret de conejo para WB, IF/ICC, ELISA - P07949

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de Ret

• Ret es una tirosina quinasa receptora codificada por el proto-oncogén RET (también conocido como CDHF12, CDHR16, PTC) y pertenece a la superfamilia de las cadherinas.
• La activación del receptor requiere la unión de ligandos de la familia GDNF (GDNF, NRTN, ARTN, PSPN, GDF15) a correceptores específicos GDNFR-α, lo que conduce a la autofosforilación y a la señalización descendente de MAPK y AKT. Referencias relacionadas: PMID:21994944, PMID:23333276, PMID:24560924
• Actúa como un receptor de dependencia en somatotrofos pituitarios, promoviendo la supervivencia en presencia de GDNF pero desencadenando apoptosis tras la retirada del ligando. Referencias relacionadas: PMID:20616503, PMID:21994944
• Participa en la organogénesis: es necesario para el desarrollo del sistema nervioso entérico, los riñones y los tejidos linfoides asociados al intestino (por similitud), y desencadena la diferenciación de mecanorreceptores de adaptación rápida. Referencias relacionadas: PMID:20064382
• Media las respuestas aversivas inducidas por GDF15 en el tronco encefálico, incluyendo náuseas y pérdida de apetito, a través del correceptor GFRAL. Referencias relacionadas: PMID:28846097, PMID:28846099, PMID:28953886
• Regula la adhesión y migración celular mediante mecanismos dependientes de caspasa e integrinas. Referencias relacionadas: PMID:20702524, PMID:21357690
• Fosforila PTK2/FAK1 tras la activación. Referencias relacionadas: PMID:21454698
• El empalme alternativo genera isoformas con diferente potencia de señalización; la isoforma 1 induce una activación de MAPK más fuerte que la isoforma 2. Las mutaciones en RET se asocian con neoplasia endocrina múltiple tipo 2 (MEN2A/MEN2B) y enfermedad de Hirschsprung.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno se dirige a un péptido C-terminal (aa 1000–1100) dentro del dominio quinasa; por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer Ret de longitud completa (~124 kDa) y posiblemente fragmentos C-terminales o isoformas escindidas.
• Para Western blot, considere usar condiciones reductoras y valide el peso molecular esperado; tenga en cuenta que la glicosilación y el procesamiento proteolítico pueden producir bandas adicionales.
• En inmunofluorescencia/ICC, anticipe tinción de membrana y endosomal; optimice los protocolos de fijación y permeabilización para su tipo celular.
• Incluya controles apropiados como líneas celulares que expresen Ret conocidas (por ejemplo, células de cáncer neuroendocrino o tiroideo) y muestras tratadas con imatinib para confirmar la especificidad.
• Para aplicaciones de ELISA, titule el anticuerpo y utilice una estrategia de pareja emparejada con un anticuerpo de detección para una sensibilidad óptima.

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