Anticuerpo policlonal de conejo Anti-RFC1 para WB, IF/ICC y ELISA - P35251

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de RFC1

• RFC1 codifica la subunidad grande (140 kDa) del complejo heteropentamérico del factor de replicación C (RFC), también conocido como activador 1.
• El complejo RFC es necesario para la elongación de moldes de ADN cebados por las ADN polimerasas delta y épsilon, y carga la PCNA en el ADN de forma dependiente de ATP (PubMed:9488738).
  Referencias relacionadas:
  PMID:9488738
• Esta subunidad se une específicamente a la unión cebador-molde y puede interactuar tanto con ADN de cadena simple como de doble cadena, además de secuencias ricas en GA que incluyen el elemento de transcripción PO-B, lo que sugiere una doble función en la replicación del ADN y la regulación de la transcripción.
• RFC1 se localiza en el núcleo y se expresa de forma generalizada en todos los tejidos humanos, excepto en la placenta.
• La proteína sufre modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación y ubiquitinación (enlace isopéptido), según lo indicado por estudios proteómicos a gran escala.
• Las mutaciones en RFC1 están asociadas con el síndrome de ataxia cerebelosa, neuropatía y areflexia vestibular (CANVAS), lo que amplía su relevancia clínica más allá del metabolismo central del ADN.
• El empalme alternativo genera múltiples variantes de transcripción, lo que contribuye a la diversidad funcional.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western blot, se espera una banda alrededor de 128 kDa. Utilice SDS-PAGE al 6-8% para una separación óptima de proteínas de alto peso molecular.
• Para inmunofluorescencia/ICC, incluya una contrateñación nuclear (por ejemplo, DAPI) y confirme la localización nuclear. Las condiciones de permeabilización pueden necesitar optimización.
• ELISA: El anticuerpo se puede utilizar para detectar RFC1 recombinante o endógeno; realice una titulación adecuada.
• La alineación de secuencias del inmunógeno (aa 400-700) entre humano, ratón y rata indica una alta conservación, lo que respalda la reactividad cruzada reportada; sin embargo, valídelo en su configuración experimental específica.

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