Anticuerpo Policlonico de Conejo Anti-Rodopsina para WB, IHC-P, ELISA - P08100

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Rodopsina

• La rodopsina (también conocida como Opsina-2) es una proteína fotorreceptora acoplada a proteína G codificada por el gen RHO en humanos, esencial para la visión en condiciones de baja luminosidad.
• Su función consiste en activar la cascada de señalización de la proteína G transducina (Gt) tras la absorción de fotones por su cromóforo 11-cis-retinal unido covalentemente, que se isomeriza a todo-trans-retinal, induciendo un cambio conformacional que desencadena la fototransducción. Referencias relacionadas: PMID:6140680 PMID:7846071 PMID:8107847
• Este receptor es necesario para la viabilidad de las células fotorreceptoras postnatales y es fundamental para la formación de los segmentos externos de los bastones. Referencias relacionadas: PMID:12566452 PMID:2215617
• La terminación de la señal se produce mediante la fosforilación del receptor, que promueve la unión de arrestina (SAG) y el desplazamiento de la subunidad alfa de la proteína G. Referencias relacionadas: PMID:26200343
• La rodopsina se localiza exclusivamente en la membrana de los segmentos externos de los fotorreceptores, donde constituye el componente proteico principal de los discos de las células bastón.
• La proteína sufre varias modificaciones postraduccionales que incluyen acetilación, palmitoilación, fosforilación y glicosilación, y contiene un puente disulfuro esencial; se une al cromóforo retinal y a un ion zinc.
• Se expresa específicamente en las células fotorreceptoras en forma de bastón, que median la visión escotópica (baja luminosidad).
• Las mutaciones en RHO están asociadas a enfermedades retinianas como la retinitis pigmentosa y la ceguera nocturna estacionaria congénita.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a la región C-terminal (aminoácidos 200–348) de la rodopsina humana (NP_000530.1). Esta región es relativamente conservada, lo que puede contribuir a la reactividad cruzada reportada con ratón y rata.
• Para Western blotting, el peso molecular predicho de la rodopsina humana sin modificar es de aproximadamente 39 kDa; sin embargo, la glicosilación y otras modificaciones pueden causar desplazamientos de las bandas. Incluya controles positivos adecuados (por ejemplo, lisado de tejido retiniano) y tenga en cuenta la naturaleza de proteína de membrana del objetivo.
• Para inmunohistoquímica (parafina), las condiciones de recuperación de antígeno deben optimizarse para secciones retinianas; se espera señal en los segmentos externos de los fotorreceptores. Se recomienda el bloqueo de peroxidasa endógena y una fijación adecuada del tejido.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir ensayos de competición con péptidos para confirmar la especificidad; considere recubrir con péptido inmunógeno o proteína recombinante.
• Como con cualquier anticuerpo policlonal, es posible que exista variabilidad entre lotes; valide lotes nuevos en el sistema de muestra correspondiente antes de usarlos a gran escala.

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