Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-RHOH para WB, IF/ICC, ELISA - Q15669

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RHOH

• RHOH (proteína de unión a GTP relacionada con Rho, RhoH), también conocida como TTF (proteína de translocación tres cuatro), pertenece a la familia de las GTPasas Rho pero es atípica: se une a GTP pero carece de actividad GTPasa intrínseca y es resistente a las RhoGAPs.
• Funciona como un regulador negativo crítico de la proliferación, supervivencia y migración de células progenitoras hematopoyéticas; es esencial para el desarrollo de timocitos y la señalización del TCR al mediar el reclutamiento y activación de ZAP70.
• Se requiere para la fosforilación de CD3Z, la translocación de la membrana de ZAP70 y la activación del señalosoma LAT descendente durante la señalización del pre-TCR y TCR, asegurando una selección beta y una selección positiva eficientes.
• Desempeña funciones clave en la función de las células cebadas al facilitar la fosforilación de SYK en la transducción de señales mediada por FcεRI y permitir la movilización de calcio.
• Inhibe la activación de NF-κB y CRK/p38 por TNF, y regula negativamente la producción de leucotrienos en neutrófilos.
• Localización subcelular: predominantemente citoplasmática y asociada con la membrana celular.
• Especificidad de tejido: expresión restringida a células hematopoyéticas (más alta en el timo, menor en el bazo/médula ósea); enriquecida en células T auxiliares TH1; regulada al alza en neutrófilos bajo condiciones inflamatorias (p. ej., fibrosis quística, colitis).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno comprende RHOH humano de longitud completa (aminoácidos 1-191), lo que hace que este anticuerpo policlonal sea adecuado para detectar múltiples epítopes; la dilución óptima y las condiciones deben determinarse empíricamente para cada aplicación.
• Para la transferencia Western (WB), el peso molecular predicho es de ~21 kDa; use un gel de SDS-PAGE al 12–15% y valide con líneas celulares hematopoyéticas (p. ej., Jurkat, THP-1) que se sabe que expresan RHOH.
• Para inmunofluorescencia/ICC, se requiere permeabilización para la tinción citoplasmática/de membrana; incluya los controles apropiados dada la expresión hematopoyética restringida.
• Se informa reactividad cruzada con ratón; este anticuerpo puede usarse en modelos de ratón, pero se recomienda la validación en la especie y tejido relevantes.
• Las aplicaciones de ELISA pueden explorarse usando proteína recombinante como estándar; considere optimizar las condiciones de recubrimiento y detección.

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