Anticuerpo Monoclonal Anti-Rig-I/DDX58 para WB, ELISA - O95786

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Rig-I/DDX58

• RIG-I (gen I inducible por ácido retinoico), también conocido como DDX58, es una ARN helicasa dependiente de ATP que pertenece a la familia de sensores inmunes innatos de receptores tipo RIG-I (RLR).
• Funciona como un receptor inmune innato citoplasmático que detecta ácidos nucleicos virales y desencadena cascadas de señalización que conducen a la producción de interferón tipo I y citoquinas proinflamatorias. Referencias relacionadas: PMID:15208624, PMID:15708988, PMID:16125763
• Reconoce ARN monocatenario y bicatenario con 5'-trifosfato, con un requisito crítico de emparejamiento de bases de extremo romo en el extremo 5'; los ARNbc cortos (<1 kb) son ligandos efectivos. Referencias relacionadas: PMID:15208624, PMID:15708988, PMID:19576794
• Tras la unión del ligando, RIG-I se homooligomeriza y recluta la E3 ligasa RNF135, lo que lleva a la asociación de MAVS, activación de TBK1/IKBKE y fosforilación de IRF3/IRF7 para inducir genes antivirales. Referencias relacionadas: PMID:15208624, PMID:15708988, PMID:28469175, PMID:31006531
• Detecta una amplia gama de virus de ARN de cadena positiva y negativa, incluidos influenza, hepatitis C, dengue y virus sincitial respiratorio, así como rotavirus y reovirus. Referencias relacionadas: PMID:21616437, PMID:21884169
• También media respuestas antivirales a virus de ADNbc como el virus de Epstein-Barr al reconocer intermediarios de ARNbc transcritos por la ARN polimerasa III. Referencias relacionadas: PMID:19631370
• Se localiza en el citoplasma, citoesqueleto, proyecciones celulares (membranas de ruffles) y uniones estrechas; se expresa en células de músculo liso vascular.
• Sufre acetilación y fosforilación; alberga dominios de dedo de zinc y helicasa; participa en interacciones huésped-virus a través de ubiquitinación y formación de enlaces isopeptídicos.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• Para Western blot, el peso molecular predicho es de aproximadamente 107 kDa. Considere usar controles positivos como líneas celulares humanas infectadas viralmente (por ejemplo, A549 estimulada con poli(I:C) o infectada con virus Sendai) para verificar la inducción de RIG-I, ya que la expresión basal puede ser baja en células no estimuladas.
• Dado que el inmunógeno es un péptido sintético, se espera que el anticuerpo reconozca un epítopo lineal. Valide la detección de RIG-I endógeno en su sistema de muestra y optimice las condiciones de bloqueo y lavado para reducir la unión inespecífica.
• En ELISA, el anticuerpo puede emplearse como reactivo de captura o detección. Para ensayos cuantitativos, se recomienda emparejarlo con un anticuerpo de detección compatible.
• Almacene según lo recomendado en bolsa de hielo al recibirlo y manténgalo a -20°C o -80°C para almacenamiento a largo plazo; minimice los ciclos de congelación-descongelación.
• Este anticuerpo se genera contra RIG-I humano y está validado para muestras humanas; la reactividad cruzada con otras especies no se ha determinado y debe verificarse si se usa en modelos no humanos.

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