Anticuerpo monoclonal anti-RING1B/RNF2 para WB, IP y ELISA - Q99496

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de RING1B/RNF2

• RING1B/RNF2, también conocido como RING2, RING1b o BAP-1, es una ubiquitina-proteína ligasa E3 que cataliza la monoubiquitinación de la histona H2A en Lys-119 (H2AK119Ub), una modificación clave para la represión transcripcional epigenética y la inactivación del cromosoma X. Referencias relacionadas: PMID:15386022 PMID:16359901 PMID:21772249
• Es un componente esencial del complejo represor Polycomb 1 (PRC1), que mantiene el estado silenciado de los genes del desarrollo, incluidos los clústeres Hox, mediante la modificación de la cromatina. Referencias relacionadas: PMID:16359901 PMID:26151332
• La actividad de ligasa E3 de RING1B/RNF2 se ve potenciada por la subunidad BMI1/PCGF4 de PRC1. Referencias relacionadas: PMID:21772249
• RNF2 se localiza predominantemente en el núcleo, pero también puede encontrarse en el citoplasma y asociado a los cromosomas, lo que refleja su función dinámica en la regulación de la cromatina.
• La proteína contiene un dominio de dedos de zinc de tipo RING y está sujeta a modificaciones postraduccionales, incluidas la acetilación y la fosforilación, que pueden modular su función.
• RING1B/RNF2 se ha relacionado con la asociación cromosómica dependiente del ciclo celular y AURKB lo regula negativamente en los linfocitos en reposo para mantener la transcripción.
• Además, actúa como regulador negativo de la autofagia al ubiquitinar AMBRA1 y dirigirlo a su degradación.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido sintético dentro de los aminoácidos 100–200 de RING1B/RNF2 humano; se predice que esta región es accesible en la superficie según los modelos estructurales y que debería producir anticuerpos capaces de reconocer las conformaciones nativas de la proteína en inmunoprecipitación (IP) y ELISA.
• Para la transferencia Western (WB), el peso molecular previsto es de aproximadamente 38 kDa; considere utilizar marcadores de escalera de proteínas adecuados y verificar la especificidad de la banda en lisados celulares humanos, de ratón y de rata pertinentes.
• En los experimentos de IP, la preaclaración de los lisados y la optimización de las proporciones anticuerpo-proteína pueden ayudar a minimizar el fondo; la reactividad cruzada con los ortólogos de ratón y rata permite realizar estudios comparativos.
• Para ELISA, valore el anticuerpo utilizando proteína recombinante o estándares peptídicos para determinar las concentraciones de trabajo óptimas; tenga en cuenta que este anticuerpo es monoclonal y puede presentar una alta especificidad.

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