Anticuerpo policlonal anti-RIP3/RIPK3 para IHC-P y ELISA - Q9Y572

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de RIP3

• RIP3 (proteína cinasa 3 de serina/treonina que interactúa con el receptor), también conocida como RIPK3, es una cinasa de serina/treonina que activa tanto la necroptosis como la apoptosis, dos vías paralelas de muerte celular programada. Referencias relacionadas: PMID:19524512, PMID:19524513, PMID:22265413
• Tras su activación por ZBP1, RIPK3 forma un complejo inductor de necrosis y fosforila MLKL, lo que provoca la permeabilización de la membrana plasmática y la muerte celular por necroptosis. Referencias relacionadas: PMID:19524512, PMID:19524513, PMID:22265413
• RIPK3 también regula la apoptosis extrínseca mediante un mecanismo dependiente de RIPK1, FADD y CASP8, independiente de MLKL y de su propia actividad cinasa.
• La proteína se localiza predominantemente en el citosol, pero también puede encontrarse en el núcleo, donde media la necroptosis nuclear en respuesta a infecciones virales causadas por virus como los ortomixovirus.
• RIPK3 se expresa en gran medida en el páncreas y se detecta en niveles inferiores en el corazón, la placenta, los pulmones y el riñón; su expresión aumenta significativamente en los cánceres de colon y pulmón.
• En ciertos tipos celulares, RIPK3 restringe la replicación viral mediante vías independientes de la muerte celular, por ejemplo, al aumentar la expresión de ACOD1/IRG1 y la síntesis de itaconato tras la infección por el virus del Zika.
• RIPK3 se une a las enzimas metabólicas GLUL, GLUD1 y PYGL y potencia su actividad, lo que podría estimular el ciclo del ácido tricarboxílico, la fosforilación oxidativa y la producción de ROS. Referencias relacionadas: PMID:19498109
• La cinasa experimenta fosforilación, ubiquitinación y formación de enlaces isopeptídicos, y está sujeta a corte y empalme alternativo, lo que contribuye a la diversidad funcional.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo policlonal se produce contra un péptido sintético que abarca los aminoácidos 410-518 (región C-terminal) de RIP3 humano. Se espera que reconozca RIP3 de longitud completa y también puede detectar variantes de corte y empalme que contengan este epítopo.
• Para IHC-P, considere optimizar las condiciones de recuperación antigénica (por ejemplo, utilizando tampones de citrato o EDTA con tratamiento térmico) y valide la especificidad de la tinción mediante controles tisulares adecuados (positivos y negativos) y, si es posible, mediante preabsorción con el péptido inmunógeno.
• En ELISA, asegúrese de que el antígeno de recubrimiento corresponda a la región del inmunógeno o utilice una proteína recombinante de longitud completa. Compruebe la consistencia entre lotes titulando el anticuerpo frente a un estándar conocido.
• Al tratarse de un reactivo policlonal, puede producirse variabilidad entre lotes; incluya una referencia interna al comparar resultados entre experimentos.

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