Anticuerpo Monoclonal Anti-RIPK1/RIP para WB, IP, ELISA - Q13546

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RIPK1

• RIPK1, también conocido como RIP1 o proteína de muerte celular RIP, es una serina-treonina quinasa que actúa como regulador crítico de la apoptosis mediada por TNF, la necroptosis y la señalización inflamatoria (PubMed:17703191, PubMed:24144979, PubMed:31827280). Referencias relacionadas: PMID:17703191, PMID:24144979, PMID:31827280
• Presenta funciones dependientes de la actividad quinasa en la muerte celular y funciones de andamiaje independientes de la quinasa en la supervivencia celular, incluida la activación de la vía canónica NF-kappa-B (PubMed:11101870, PubMed:19524512, PubMed:19524513). Referencias relacionadas: PMID:11101870, PMID:19524512, PMID:19524513
• RIPK1 regula el ensamblaje de dos complejos inductores de muerte: el complejo IIa (RIPK1-FADD-CASP8) para la apoptosis y el complejo IIb (RIPK1-RIPK3-MLKL) para la necroptosis.
• Inhibe la necroptosis dependiente de RIPK3 al reclutar CASP8 a través de FADD, que escinde RIPK1, limitando así la necroptosis inducida por TNF (PubMed:19524512, PubMed:19524513, PubMed:29440439). Referencias relacionadas: PMID:19524512, PMID:19524513, PMID:29440439
• RIPK1 se localiza predominantemente en el citoplasma y en la membrana celular, lo que coincide con su papel en la transducción de señales de TNFR1.
• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen fosforilación, ubiquitinación (enlace isopéptido) y escisión proteolítica por CASP8, que regulan sus funciones pro-muerte y pro-supervivencia.
• También promueve la transcripción de citocinas proinflamatorias como la IL-6, conectando la muerte celular con las respuestas inmunitarias (PubMed:31827280, PubMed:31827281). Referencias relacionadas: PMID:31827280, PMID:31827281

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 289-490 de la RIPK1 humana, una región que abarca parte del dominio quinasa; este diseño puede favorecer la detección tanto de fragmentos de longitud completa como de fragmentos que contienen el dominio quinasa.
• Para Western blot, se espera una banda alrededor de 76 kDa. Se recomienda incluir controles adecuados para tener en cuenta los productos de escisión que pueden surgir durante la apoptosis o la necroptosis.
• En inmunoprecipitación, valide el rendimiento del anticuerpo con interactores conocidos de RIPK1 como TRADD o FADD en condiciones de estimulación adecuadas (por ejemplo, tratamiento con TNF).
• Los experimentos de ELISA se pueden optimizar para la cuantificación de RIPK1 en lisados celulares u homogenizados de tejido; se debe evaluar la reactividad cruzada con otros miembros de la familia RIP.

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