Anticuerpo Policlonal Anti-RNF168 para WB, ELISA - Q8IYW5

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RNF168

• Ligasa de ubiquitina-proteína E3 que cataliza la monoubiquitinación de la histona nucleosomal H2A en Lys-13 y Lys-15 (H2AK13Ub y H2AK15Ub), desempeñando un papel central en la respuesta al daño del ADN.
• Actúa con UBE2N/UBC13 aguas abajo de RNF8 para amplificar la ubiquitinación de las histonas H2A y H2AX en roturas de doble cadena, promoviendo la formación de cadenas de ubiquitina unidas por 'Lys-63' y el reclutamiento de las proteínas de reparación TP53BP1 y BRCA1.
• También se recluta en sitios de entrecruzamiento intercadena del ADN (ICL), donde media la ubiquitinación unida por 'Lys-63' de las histonas H2A y H2AX, facilitando el ensamblaje y reparación del complejo de anemia de Fanconi (FA).
• Tras el daño del ADN, colabora con RNF8 para ubiquitinar y degradar JMJD2A/KDM4A, desenmascarando la marca H4K20me2 para promover la carga de TP53BP1 en los sitios de daño.
• Participa en la recombinación de cambio de clase en el sistema inmunitario regulando las vías de reparación de roturas de doble cadena.
• Se localiza en el núcleo, donde es reclutada a las lesiones del ADN mediante la unión a histonas H2A y H2AX previamente ubiquitinadas.
• Pertenece a la familia de proteínas de dedo de zinc RING; contiene un dominio RING N-terminal y motivos MIU C-terminales que median la unión a ubiquitina.
• Clasificada como regulador de la cromatina y factor de reparación del ADN; palabras clave biológicas importantes incluyen: unión a metales, fosfoproteína, transferasa y vía de conjugación Ubl.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 300–571 de RNF168 humana, una región que abarca los motivos MIU C-terminales; este diseño puede favorecer la detección de la proteína de longitud completa a ~65kDa.
• Para Western blotting, considere probar extractos nucleares de líneas celulares humanas o de ratón, ya que RNF168 se localiza en el núcleo y su expresión puede inducirse en condiciones de daño del ADN.
• ELISA puede usarse para cribar sobrenadantes de hibridoma o cuantificar niveles de RNF168; asegúrese de utilizar el inmunógeno recombinante o un péptido relevante como antígeno de recubrimiento.
• Dado que RNF168 funciona en la señalización dependiente de ubiquitina, incluya inhibidores apropiados de proteasas y desubiquitinasas durante la preparación de la muestra para preservar posibles especies ubiquitinadas.
• Valide la especificidad del anticuerpo y la dilución óptima en su propio sistema experimental, ya que el rendimiento puede variar según el tipo de muestra y el tratamiento.

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