Anticuerpo policlonal de conejo Anti-RNF185 para WB y ELISA - Q96GF1

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de RNF185

• RNF185 (proteína de dedo RING 185) es una ubiquitina-proteína ligasa E3 que se caracteriza por la presencia de un dominio de dedo de zinc tipo RING, que media su actividad catalítica de transferasa.
• Media la poliubiquitinación ligada a Lys-63 de BNIP1, un paso clave en la regulación de la autofagia mitocondrial selectiva (mitofagia). Referencias relacionadas: PMID:21931693
• Al actuar en la vía de degradación asociada al retículo endoplásmico (ER, por sus siglas en inglés) (ERAD, por sus siglas en inglés), RNF185 dirige a las proteínas mal plegadas para su ubiquitinación y posterior degradación mediada por el proteasoma, protegiendo así a las células de la apoptosis inducida por el estrés reticular. Referencias relacionadas: PMID:27485036
• Es responsable de la ubiquitinación cotraduccional y la degradación del regulador de conductancia transmembrana de la fibrosis quística (CFTR, por sus siglas en inglés) en la vía ERAD, y se asocia preferentemente con las enzimas E2 UBE2J1 y UBE2J2. Referencias relacionadas: PMID:24019521
• En la respuesta antiviral innata, RNF185 cataliza la poliubiquitinación ligada a Lys-27 de cGAS en los residuos K173 y K384, potenciando su actividad de sintasa de GMP-AMP cíclico. Referencias relacionadas: PMID:28273161
• Estudios de localización subcelular revelan que RNF185 está anclada a la membrana externa mitocondrial y a la membrana del retículo endoplásmico, lo que coincide con sus roles duales en la mitofagia y la ERAD.
• Según UniProt, el empalme alternativo de RNF185 genera múltiples isoformas, que pueden presentar propiedades funcionales distintas.
• La proteína se expresa de forma ubicua en todos los tejidos humanos, lo que apoya una función de mantenimiento generalizada en la homeostasis celular.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aminoácidos 1–130) de la RNF185 humana, lo que puede permitir la detección de diversas isoformas y variantes de empalme. Los usuarios deben validar el reconocimiento del anticuerpo de las isoformas específicas en sus muestras diana.
• Para Western blotting, se puede esperar una banda principal cerca de 20 kDa (peso molecular predicho: 20,5 kDa según UniProt; el proveedor informa 20 kDa). Debido al empalme alternativo, se pueden observar bandas adicionales; se recomienda optimizar las condiciones de bloqueo y detección.
• Se ha informado que el anticuerpo presenta reacción cruzada con la RNF185 de ratón y rata; sin embargo, se aconseja realizar una validación específica por especie en el sistema experimental correspondiente.
• Cuando se usa en ELISA, considere emplear el inmunógeno recombinante o extractos de proteínas nativas como antígenos de recubrimiento, e incluya controles positivos y negativos apropiados.

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