Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-RNF20 para WB y ELISA - Q5VTR2

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RNF20 (BRE1A)

• RNF20 (también conocido como BRE1A) es una proteína con dedo RING que funciona como la subunidad catalítica del complejo ligasa de ubiquitina-proteína E3 RNF20/40, mediando específicamente la monoubiquitinación de la histona H2B en la lisina 120 (H2BK120ub1).
• H2BK120ub1 sirve como una marca epigenética que es un requisito previo para la metilación de la histona H3 en Lys-4 y Lys-79 (H3K4me y H3K79me), desempeñando un papel central en el código de histonas y la regulación génica.
• El complejo RNF20/40 coopera con las enzimas E2 UBE2A o UBE2B para formar la ligasa de ubiquitina de la histona H2B y es necesaria para la activación transcripcional de los genes Hox.
• RNF20 actúa como un coactivador transcripcional al ser reclutado al promotor de MDM2, probablemente por p53/TP53, y también media la poliubiquitinación de la isoforma 2 de PA2G4 en células cancerosas, lo que conduce a su degradación proteasómica.
• La proteína se localiza exclusivamente en el núcleo, lo cual es consistente con sus funciones de regulación de la cromatina.
• RNF20 se expresa en tejido cerebral normal y gliomas malignos a nivel proteico, y está sujeta a acetilación y fosforilación como modificaciones postraduccionales.
• La proteína contiene un dominio de hélice superenrollada (coiled-coil) y un motivo de dedo de zinc, que permiten la unión de metales y la actividad típica de transferasa de ubiquitina de tipo RING.
• Durante la infección microbiana, RNF20 promueve el ciclo lítico del herpesvirus humano 8 (KSHV) al inducir la expresión de genes virales líticos, incluido el gen de conmutación de latencia RTA/ORF50.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para el análisis de Western blot, considere enriquecer las fracciones nucleares debido a la localización nuclear de RNF20 para mejorar la sensibilidad de detección.
• Valide la especificidad del anticuerpo utilizando controles de knockdown o knockout en la línea celular o sistema de tejido relevante.
• El inmunógeno de péptido sintético (aa 1-100 del RNF20 humano) puede usarse como control positivo en ensayos ELISA para confirmar la reactividad del anticuerpo.
• Dada la reactividad cruzada tanto con humano como con ratón, el anticuerpo puede ser adecuado para estudios en modelos de ratón, pero se aconseja la titulación y validación en el tipo de muestra específico.
• Dado que RNF20 sufre fosforilación y acetilación, pueden aparecer bandas adicionales bajo ciertas condiciones; los tratamientos con fosfatasa o desacetilasa pueden ayudar a confirmar la identidad de la banda.

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