Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-ROCK1 para WB, ELISA - Q13464

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ROCK1

• ROCK1 es una quinasa de serina/treonina que actúa como regulador maestro del citoesqueleto de actina, impulsando procesos esenciales como la polaridad celular, la contracción del músculo liso, la formación de fibras de estrés y adhesiones focales, la retracción de neuritas, la adhesión celular y la motilidad. Estos efectos se median a través de la fosforilación de diversos sustratos, incluyendo DAPK3, GFAP, LIMK1, LIMK2, MYL9/MLC2, TPPP, PFN1 y PPP1R12A (PubMed:10436159, PubMed:10652353, PubMed:11018042). Referencias relacionadas: PMID:10436159 PMID:10652353 PMID:11018042

• La fosforilación de FHOD1 por ROCK1 promueve sinérgicamente la formación de ampollas de membrana plasmática no apoptóticas dependientes de SRC (PubMed:18694941). Referencias relacionadas: PMID:18694941

• Bajo estrés por UVB, ROCK1 fosforila JIP3 y modula el reclutamiento consecuente de JNK, controlando la señalización de estrés aguas abajo (PubMed:19036714). Referencias relacionadas: PMID:19036714

• ROCK1 regula negativamente la activación de células endoteliales angiogénicas inducida por VEGF, limitando así la angiogénesis excesiva (PubMed:19181962). Referencias relacionadas: PMID:19181962

• ROCK1 está involucrado en procesos de diferenciación terminal, contribuyendo a la diferenciación eritroide (PubMed:21072057) y promoviendo la diferenciación terminal de queratinocitos (PubMed:19997641). Referencias relacionadas: PMID:21072057 PMID:19997641

• Subcelularmente, ROCK1 se distribuye ampliamente en el citoplasma, el citoesqueleto (centrosoma/centriolo), la membrana del aparato de Golgi, la membrana celular y las proyecciones celulares dinámicas, incluyendo ampollas, lamellipodios y ruffles. Se detecta en plaquetas sanguíneas.

• Estructuralmente, ROCK1 contiene un dominio quinasa, una región de hélice enrollada y motivos de dedo de zinc, y su actividad está modulada por fosforilación y acetilación.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para western blot, tenga en cuenta que ROCK1 de longitud completa tiene un peso molecular predicho de aproximadamente 158 kDa. Seleccione el porcentaje adecuado de gel de poliacrilamida (por ejemplo, 6–8%) y optimice las condiciones de transferencia para proteínas de alto peso molecular. Es recomendable validar la especificidad de la banda mediante ensayos de competencia con péptido o silenciamiento mediado por siRNA.
• Se confirma la reactividad de este anticuerpo con muestras de humano, ratón y rata; al usar lisados de otras especies, la reactividad cruzada debe verificarse experimentalmente.
• Para aplicaciones de ELISA, se recomienda emparejar el anticuerpo con un anticuerpo de detección compatible y establecer la linealidad y sensibilidad del ensayo estándar con proteína ROCK1 recombinante o muestras biológicas relevantes.
• Dado el diseño del inmunógeno (un péptido dentro de los residuos 1100–1200), considere que el epítopo se encuentra dentro de la región C-terminal; las condiciones desnaturalizantes o la proteólisis parcial pueden afectar la eficiencia de detección.

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