Anticuerpo policlonal de conejo anti-ROCK1 para WB, IP, IF, ELISA - Q13464

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de ROCK1

• ROCK1 es una serina/treonina-proteína quinasa y miembro de la familia de proteínas quinasas asociadas a Rho que contienen una región enrollada. También se conoce como ROCK-I o p160ROCK, y fue identificada como el antígeno de carcinoma renal NY-REN-35.
• ROCK1 es un regulador clave del citoesqueleto de actina y de la polaridad celular, y controla la contracción del músculo liso, la organización de la actina, la formación de fibras de estrés y adhesiones focales, la retracción de neuritas, la adhesión celular y la motilidad mediante la fosforilación de sustratos como DAPK3, GFAP, LIMK1/2, MYL9/MLC2, PFN1 y PPP1R12A. Referencias relacionadas: PMID:10436159, PMID:10652353, PMID:11018042
• ROCK1 fosforila FHOD1 y promueve sinérgicamente la formación de ampollas no apoptóticas en la membrana plasmática dependiente de SRC. Referencias relacionadas: PMID:18694941
• Tras el estrés inducido por UVB, ROCK1 fosforila JIP3 y regula el reclutamiento de JNK a JIP3. Referencias relacionadas: PMID:19036714
• Actúa como regulador negativo de la activación de las células endoteliales angiogénicas inducida por VEGF. Referencias relacionadas: PMID:19181962
• Promueve la diferenciación terminal de los queratinocitos. Referencias relacionadas: PMID:19997641
• Desempeña un papel en la diferenciación eritroide terminal. Referencias relacionadas: PMID:21072057
• ROCK1 se localiza en el citoplasma, el citoesqueleto, el centrosoma, el centríolo, la membrana del aparato de Golgi y la membrana celular. También se encuentra en las prolongaciones celulares, incluidas las ampollas, las lamelipodias y los bordes ondulados.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 400–660 dentro de la mitad N-terminal de ROCK1, lo que puede permitir el reconocimiento de la proteína de longitud completa y potencialmente de algunas isoformas. Verifique la reactividad en el sistema de muestras correspondiente.
• Para Western blot (WB), el peso molecular previsto es de aproximadamente 158 kDa. Utilice un porcentaje de gel adecuado (por ejemplo, SDS-PAGE al 6–8 %) y optimice las condiciones de transferencia para proteínas de alto peso molecular.
• Para la inmunoprecipitación (IP), ajuste la cantidad de anticuerpo y seleccione un tampón de unión/lavado adecuado para maximizar la eficiencia de captura.
• Para la inmunofluorescencia en cortes incluidos en parafina (IF-P), considere la recuperación antigénica inducida por calor e incluya tejidos de control tanto positivos como negativos.
• Para ELISA, pruebe con proteína ROCK1 recombinante o lisados nativos para determinar las condiciones óptimas de recubrimiento y detección. Valide con muestras positivas/negativas conocidas.

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