Anticuerpo Policlonal Anti-RPA2 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P15927

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RPA2

• RPA2, también conocido como subunidad de 32 kDa de la proteína de replicación A (RP-A p32) o RP-A p34, es un componente del complejo heterotrimérico de la proteína de replicación A (RPA), que incluye RPA1 (70 kDa), RPA2 (32 kDa) y RPA3 (14 kDa).
• El complejo RPA se une y estabiliza los intermediarios de ADN monocatenario (ssDNA) que surgen durante la replicación, reparación y recombinación del ADN, evitando su reannealamiento y facilitando el reclutamiento de proteínas metabólicas clave.
• En la replicación del ADN, RPA es esencial para las fases de iniciación y elongación, garantizando la síntesis procesiva del ADN y protegiendo la horquilla de replicación.
• Tras el daño del ADN, el complejo RPA actúa como sensor y plataforma: recluta la quinasa ATR a través de ATRIP, activando el punto de control del daño del ADN, y recluta factores de reparación como RAD51 y RAD52 para la recombinación homóloga, y XPA y XPG para la reparación por escisión de nucleótidos.
• RPA2 también participa en la reparación por escisión de bases (BER) a través de la interacción con uracilo-ADN glicosilasa (UNG) y recluta SMARCAL1/HARP a los sitios de daño para el reinicio de la horquilla de replicación.
• Además, RPA estimula la actividad helicasa 5'-3' de BRIP1/FANCJ, que participa en la reparación de enlaces cruzados entre hebras y el mantenimiento de los telómeros. Referencias relacionadas: PMID:17596542
• La proteína es predominantemente nuclear y se localiza en los cuerpos PML; sufre extensas modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación, acetilación y ubiquitinación, que regulan sus funciones en el metabolismo del ADN.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas, lo que se refleja en los pesos moleculares observados de 29, 30 y 38 kDa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los residuos 1-270 de RPA2 humano; por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer múltiples isoformas. Para Western blot, espera bandas alrededor de 29–38 kDa; valide en líneas celulares o tejidos humanos relevantes.
• RPA2 es una fosfoproteína nuclear. Considere usar inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis y, si es necesario, compare con muestras tratadas con fosfatasa para resolver los desplazamientos dependientes de fosforilación.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), se recomiendan métodos estándar de recuperación de antígeno. Optimice la dilución del anticuerpo primario y las condiciones de detección para su tipo de tejido.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), utilice protocolos de fijación y permeabilización adecuados para antígenos nucleares. Incluya controles apropiados para confirmar la especificidad.
• Este anticuerpo también es adecuado para ELISA; asegúrese de que la proteína recombinante o el lisado se recubran y bloqueen correctamente.

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