Anticuerpo monoclonal de conejo anti-RPA70/RPA1 para WB, IP, ELISA, ChIP - P27694

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RPA70/RPA1

• La subunidad RPA70, codificada por RPA1 (también conocida como REPA1), es el componente de unión al ADN de 70 kDa del complejo heterotrimérico de proteína A de replicación (RPA), que también incluye las subunidades RPA2 y RPA3. Juntas, se unen y estabilizan los intermediarios de ADN de cadena sencilla (ssADN).
• RPA es indispensable para la replicación del ADN cromosómico y orquesta la respuesta celular al daño en el ADN. Activa los puntos de control del daño del ADN y facilita la elección de la vía de reparación. Referencias relacionadas: PMID:9430682
• Mediante el reclutamiento de ATRIP, RPA activa la quinasa ATR, un regulador maestro de la respuesta al daño del ADN, vinculando la detección de ssADN con la señalización global del punto de control. Referencias relacionadas: PMID:24332808
• RPA es necesario para el reclutamiento de los factores de recombinación homóloga RAD51 y RAD52 a la cromatina en los sitios de roturas de doble cadena del ADN. Referencias relacionadas: PMID:17765923
• En la reparación por escisión de nucleótidos (NER), RPA recluta directamente a XPA y XPG en los sitios dañados y es esencial para el paso de incisión/excisión dual de esta vía de reparación. Referencias relacionadas: PMID:7697716
• RPA contribuye al mantenimiento de los telómeros, preservando la integridad genómica, y las mutaciones en RPA1 están vinculadas a trastornos de la biología de los telómeros. Referencias relacionadas: PMID:17959650 | PMID:34767620
• Un complejo RPA alternativo, aRPA, se forma cuando RPA4 reemplaza a RPA2. Este complejo conserva la capacidad de unión a ssADN pero funciona principalmente en la reparación del ADN en lugar de en la replicación del ADN cromosómico. Referencias relacionadas: PMID:19996105
• RPA estimula la actividad helicasa 5'-3' de BRIP1/FANCJ, vinculándola con la reparación de enlaces cruzados entre cadenas y manteniendo la estabilidad de la horquilla de replicación. Referencias relacionadas: PMID:17596542
• RPA70 es predominantemente nuclear y se localiza en los cuerpos de PML. Está sujeto a extensas modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación, acetilación y ubiquitinación, que regulan su actividad e interacciones proteicas.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético dentro de la región N-terminal (aminoácidos 1–100). Para Western blot, el peso molecular esperado es aproximadamente 68 kDa; lisados celulares totales de células cultivadas humanas o de rata son materiales de partida adecuados.
• Para ensayos de ChIP, tenga en cuenta que el epítopo se encuentra en una región no estructurada; considere inducir daño en el ADN (por ejemplo, con tratamiento de UV o hidroxiurea) para enriquecer los locus unidos a RPA y verificar el rendimiento.
• En aplicaciones de IP y ELISA, pruebe previamente el anticuerpo bajo sus condiciones específicas de tampón, ya que reconoce un epítopo lineal. Incluya los controles apropiados.
• Valide la especificidad del anticuerpo en su sistema utilizando muestras de silenciamiento mediado por siRNA o knockout por CRISPR/Cas9.

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