Anticuerpo policlonal anti-RPE65 para WB y ELISA - Q16518

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la RPE65

• La RPE65, también conocida como retinoide isomerohidrolasa, p63, BCO3, LCA2, RP20, rd12, mRPE65 y sRPE65, es una enzima clave en el ciclo visual.
• Cataliza la escisión isomerohidrolasa de los ésteres de todo-trans-retinilo a 11-cis-retinol, un paso crítico en la regeneración del cromóforo visual 11-cis-retinal. Referencias relacionadas: PMID:16116091
• La RPE65 es esencial para la producción de 11-cis retinal tanto para los fotorreceptores de bastones como de conos, como se ha demostrado en estudios funcionales. Referencias relacionadas: PMID:17848510
• La enzima también exhibe actividad isomerasa hacia la luteína, convirtiéndola en meso-zeaxantina, un carotenoide específico del ojo. Referencias relacionadas: PMID:28874556
• Subcelularmente, la RPE65 se localiza en el citoplasma, la membrana celular y las membranas microsomales, y su asociación a la membrana está regulada por palmitoilación.
• Su expresión es altamente específica del epitelio pigmentario de la retina (EPR) a nivel proteico.
• Las mutaciones en el gen RPE65 están relacionadas con distrofias retinianas hereditarias, incluyendo la amaurosis congénita de Leber tipo 2 (LCA2) y la retinitis pigmentosa tipo 20 (RP20).
• Las modificaciones postraduccionales como la acetilación, la palmitoilación y la fosforilación desempeñan papeles importantes en la modulación de su actividad y tráfico subcelular.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 340–440 de la RPE65 humana, una región bien conservada entre humanos y ratones, lo que probablemente explica la reactividad cruzada observada. Los usuarios deben verificar la reactividad con otras especies si es necesario mediante alineación de secuencias.
• Para Western blotting (WB), el peso molecular predicho es de 61 kDa. Incluya controles positivos adecuados (por ejemplo, lisados de epitelio pigmentario de la retina) y optimice las condiciones de bloqueo para minimizar las bandas inespecíficas.
• Para ELISA, este anticuerpo policlonal puede explorarse como reactivo de captura o detección. Se recomienda la titulación en el tampón de ensayo específico para determinar la concentración de trabajo óptima.
• Dado que la RPE65 es una proteína asociada a la membrana, considere el uso de tampones de lisis que contengan detergentes suaves (como Triton X-100 al 0,1% o NP-40) para mejorar la eficiencia de la extracción de proteínas para aplicaciones posteriores.

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