Anticuerpo policlonal de conejo anti-RRM1 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P23921

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de RRM1

• RRM1 es la subunidad grande de la ribonucleótido reductasa (RNR), una enzima heterodimérica esencial para la síntesis de novo de difosfatos de desoxirribonucleósidos (dNDP) a partir de difosfatos de ribonucleósidos (rNDP), proporcionando los precursores monoméricos necesarios para la replicación y reparación del ADN.
• Funciona como una enzima alostérica, cuya actividad está regulada por la unión de ATP y cuya especificidad por el sustrato nucleotídico está controlada por la unión de dATP, dGTP o dTTP al sitio de especificidad.
• RRM1 debe formar un complejo con una subunidad pequeña (RRM2 o p53R2) para constituir la holoenzima activa; la subunidad grande aporta los sitios catalíticos y de regulación alostérica.
• A nivel subcelular, RRM1 se localiza principalmente en el citoplasma, donde tienen lugar el metabolismo de nucleótidos y la síntesis de precursores del ADN.
• Entre las modificaciones postraduccionales se incluyen la acetilación y la fosforilación, que pueden modular la actividad enzimática, la estabilidad o las interacciones proteína-proteína.
• Las mutaciones en RRM1 están asociadas con síndromes autosómicos recesivos de agotamiento del ADN mitocondrial, incluida la oftalmoplejía externa progresiva, lo que pone de relieve su función esencial en el mantenimiento de reservas equilibradas de dNTP para la síntesis del ADN mitocondrial.
• La proteína pertenece a la familia de la ribonucleótido reductasa de clase I y comparte homología estructural con las subunidades grandes de la RNR bacteriana y eucariota.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Según el inmunógeno (región C-terminal, aa 593-792), se espera que el anticuerpo reconozca la proteína RRM1 de longitud completa (~90 kDa) y pueda detectar isoformas o productos de escisión; incluya marcadores de peso molecular y controles adecuados.
• Para el Western blot, utilice condiciones optimizadas de carga y transferencia para dianas de alto peso molecular; considere la quimioluminiscencia mejorada y tiempos de exposición prolongados.
• En inmunofluorescencia/ICC, se espera una localización citoplasmática; fije y permeabilice las células adecuadamente (por ejemplo, PFA al 4 % seguido de permeabilización con Triton X-100) para garantizar el acceso del anticuerpo.
• Para la inmunoprecipitación, confirme la compatibilidad con su tampón de lisis y las condiciones de elución; utilice un lisado de control positivo (por ejemplo, HeLa o HEK293) para verificar la eficiencia de captura.
• El anticuerpo muestra reactividad con muestras humanas y de ratón; si analiza otras especies, valide la reactividad cruzada debido a la posible divergencia de secuencia en el epítopo diana.

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