Anticuerpo monoclonal de conejo anti-RSK2 / RPS6KA3 para WB, IHC-P, ELISA - P51812

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de RSK2

• RSK2 (Proteína ribosomal S6 quinasa alfa-3), también conocida como RPS6KA3, p90RSK3, MAPKAPK1B e ISPK-1, es una serina/treonina-proteína quinasa codificada por el gen RPS6KA3 en el cromosoma X humano. Pertenece a la familia de quinasas AGC y contiene dos dominios de quinasa conectados por una región de enlace.
• Actuando aguas abajo de la cascada de señalización ERK/MAPK, RSK2 fosforila directamente el factor de transcripción CREB1 y la histona H3 en Ser-10 tras la estimulación con EGF, desencadenando la expresión de genes de respuesta temprana (PubMed:10436156, 9770464).
  Referencias relacionadas: PMID:10436156 PMID:9770464
• RSK2 promueve la supervivencia celular al fosforilar e inactivar los factores proapoptóticos BAD y DAPK1, suprimiendo así sus funciones apoptóticas (PubMed:16213824).
  Referencias relacionadas: PMID:16213824
• A través de la fosforilación de la proteína ribosomal S6 (RPS6) y del factor de iniciación de la traducción EIF4B, RSK2 mejora la traducción dependiente de cap en respuesta a insulina y mitógenos (PubMed:17360704, 18508509, 18813292).
  Referencias relacionadas: PMID:17360704 PMID:18508509 PMID:18813292
• RSK2 integra señales de nutrientes y crecimiento al fosforilar TSC2 y RPTOR, reguladores clave de mTORC1, modulando así la señalización de mTOR independientemente de la vía PI3K/AKT (PubMed:18722121).
  Referencias relacionadas: PMID:18722121
• Localizado tanto en el núcleo como en el citoplasma, RSK2 se expresa en muchos tejidos, con los niveles más altos encontrados en el músculo esquelético.
• Las mutaciones en RPS6KA3 están asociadas con el síndrome de Coffin-Lowry (CLS), una discapacidad intelectual ligada al cromosoma X caracterizada por retraso psicomotor y anomalías esqueléticas.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 600-700 de RSK2 humano, una región conservada en humanos, ratones y ratas, lo que respalda la reactividad cruzada observada. Para Western blot, se espera una banda de aproximadamente 84 kDa; considere usar muestras reducidas y cargar 20-30 µg de lisado celular. Valide la especificidad de la banda utilizando controles positivos apropiados (por ejemplo, células HeLa, A431 o NIH/3T3) y controles negativos (por ejemplo, lisados knockout de RSK2 o muestras tratadas con siRNA).
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), se recomienda la recuperación de antígeno mediada por calor con tampón de citrato (pH 6.0). Titre el anticuerpo primario comenzando con una dilución de 1:50-1:200 y optimice la detección con un sistema de polímero-HRP. Incluya siempre controles de isotipo y secciones de tejido conocidas por expresar RSK2.
• En aplicaciones de ELISA, considere recubrir con proteína o péptido recombinante de RSK2 y utilice un protocolo ELISA indirecto estándar. La concentración óptima de trabajo del anticuerpo debe determinarse empíricamente mediante titulación en damero.

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