Anticuerpo Policlonal Anti-RTF1 de Conejo para WB, ELISA - Q92541

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de RTF1

• RTF1 (homólogo de la proteína asociada a la ARN polimerasa RTF1), también conocido como GTL7 y KIAA0252, es un componente central del complejo PAF1 (PAF1C) que regula la elongación de la transcripción por la ARN polimerasa II y la modificación de la cromatina.
• PAF1C se asocia con la ARN polimerasa II mediante la interacción con el dominio C-terminal (CTD) de POLR2A tanto en formas no fosforiladas como fosforiladas (Ser-2 y Ser-5), actuando de forma independiente y sinérgica con factores de elongación como TCEA1.
• El complejo es esencial para la transcripción de genes del desarrollo, incluidos los genes diana Hox y Wnt, y juega un papel en la hematopoyesis y la leucemogénesis a través de su asociación con oncoproteínas reordenadas de KMT2A/MLL1.
• RTF1 se localiza en el nucleoplasma dentro del núcleo, en consonancia con su función en la regulación de la transcripción.
• PAF1C está involucrado en modificaciones de histonas: recluta la ligasa E3 de ubiquitina RNF20/40 y las enzimas E2 UBE2A/B para catalizar la monoubiquitinación de la histona H2B en Lys-120 (H2BK120ub1), y es necesario para la trimetilación de la histona H3 en Lys-4 (H3K4me3) en genes de pluripotencia de células madre.
• La proteína contiene un dominio de hélice superenrollada, se une al ADN de cadena simple y está regulada por fosforilación.
• Durante la infección por influenza A H3N2, PAF1C interactúa con la proteína viral NS1 para modular la transcripción de genes del huésped.
• RTF1 es necesario para la inducción máxima de genes de choque térmico.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno fue un péptido sintético que abarca los aminoácidos 300-400 de RTF1 humano; considere usar esta región para verificar la especificidad del anticuerpo mediante experimentos de bloqueo con péptido.
• Para Western blot, RTF1 humano tiene un peso molecular predicho de ~80 kDa; valide con controles positivos y negativos apropiados (por ejemplo, lisados de células humanas y de ratón) ya que se reporta reactividad cruzada con ratón.
• El anticuerpo es adecuado para ELISA; optimice las condiciones de recubrimiento y detección basándose en la localización nucleoplásmica del objetivo.
• RTF1 es una fosfoproteína; tenga en cuenta que las modificaciones postraduccionales podrían afectar la detección en ciertas preparaciones de muestra; considere inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis si es necesario.
• Para una señal enriquecida, los extractos nucleares pueden ser beneficiosos debido a la localización nuclear de RTF1.

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