Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-RUNX2 para WB, IP, ELISA - Q13950

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de RUNX2

• El factor de transcripción relacionado con Runt 2 (RUNX2), también conocido como proteína 3 de leucemia mieloide aguda (AML3), subunidad alfa-1 del factor de unión al núcleo (CBFA1) y factor de transcripción específico de osteoblastos 2 (OSF2), es un factor de transcripción que se une al ADN.
• RUNX2 es un regulador principal de la diferenciación osteoblástica y la morfogénesis esquelética, esencial para la maduración de los osteoblastos y tanto la osificación intramembranosa como la endocondral. Referencias relacionadas: PMID:28505335, PMID:28703881, PMID:28738062
• Se une a la secuencia consenso central 5'-PYGPYGGT-3' en enhancers y promotores de genes esenciales para la osteogénesis y la hematopoyesis, incluyendo osteocalcina, osteopontina, sialoproteína ósea, colágeno alfa 1(I), LCK, IL-3 y GM-CSF.
• En los osteoblastos, RUNX2 actúa en sinergia con SPEN/MINT para potenciar la activación mediada por FGFR2 del elemento sensible a FGF de la osteocalcina (OCFRE) e inhibe la activación transcripcional dependiente de KAT6B.
• A nivel subcelular, RUNX2 se localiza tanto en el núcleo como en el citoplasma.
• Su expresión es altamente específica de los osteoblastos, lo que refleja su papel fundamental en la formación ósea.
• RUNX2 sufre múltiples modificaciones postraduccionales, entre ellas fosforilación, metilación y ubiquitinación, que regulan su actividad y estabilidad, y está asociado con variantes patogénicas ligadas a la displasia esquelética.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 336–439 de la región C-terminal de la RUNX2 humana; el reconocimiento del epítopo puede verse influenciado por modificaciones postraduccionales o la conformación de este dominio.
• Para Western blot, utilice lisados de células totales de líneas celulares con fenotipo osteoblástico (por ejemplo, Saos‑2, MG‑63) o cultivos diferenciados de osteoclastos, y espere una banda predominante cerca de 57 kDa; valide el resultado con controles de carga adecuados.
• En inmunoprecipitación, ajuste la concentración del anticuerpo frente a una cantidad fija de lisado y optimice las condiciones del tampón de lisis (por ejemplo, RIPA con inhibidores de proteasas y fosfatasas) para preservar las interacciones proteicas.
• Para ELISA, considere utilizar un fragmento recombinante de RUNX2 que abarque la secuencia del inmunógeno como estándar; compruebe la reactividad cruzada con muestras de ratón si se aplica a modelos de enfermedad en roedores.
• La reactividad cruzada con ratón permite estudios comparativos en cultivos de osteoblastos de ratón o modelos óseos transgénicos, pero verifique siempre el rendimiento en el tejido o tipo celular específico de su interés.

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