Anticuerpo monoclonal anti-SAMHD1 para WB, IHC-P, ELISA - Q9Y3Z3

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de SAMHD1

• SAMHD1 (proteína 1 que contiene los dominios SAM y HD) también se conoce como DCIP, CHBL2, HDDC1, MOP-5, SBBI88 y hSAMHD1. Es una trifosfohidrolasa de trifosfato de desoxinucleósidos con funciones clave en la restricción antiviral y la reparación del ADN.
• SAMHD1 actúa como un factor de restricción del hospedador al agotar las reservas celulares de dNTP mediante su actividad dNTPasa, bloqueando así la retrotranscripción de retrovirus como el VIH-1 en células dendríticas y mieloides (PubMed:19525956, PubMed:21613998, PubMed:21720370). Referencias relacionadas: PMID:19525956 PMID:21613998 PMID:21720370
• Además de los retrovirus, SAMHD1 restringe los retrotransposones LINE-1, vinculándolo con el mantenimiento de la estabilidad del genoma (PubMed:24035396, PubMed:24217394, PubMed:29610582). Referencias relacionadas: PMID:24035396 PMID:24217394 PMID:29610582
• La fosforilación en Thr-592 actúa como un interruptor molecular: inhibe la actividad dNTPasa y la función antiviral, al tiempo que promueve la resección de los extremos del ADN en las horquillas de replicación detenidas mediante la activación de MRE11 (PubMed:23601106, PubMed:23602554, PubMed:29670289). Referencias relacionadas: PMID:23601106 PMID:23602554 PMID:29670289
• SAMHD1 se localiza predominantemente en el núcleo y se asocia con los cromosomas, en consonancia con su función en la reparación del ADN y el procesamiento de las horquillas de replicación.
• Se expresa ampliamente en tejidos, incluidos el corazón, el músculo esquelético, el bazo, el hígado, el intestino delgado, la placenta, el pulmón y los leucocitos de sangre periférica, pero está ausente en el cerebro y el timo (PubMed:11064105). Referencias relacionadas: PMID:11064105
• Entre las modificaciones postraduccionales se incluyen la acetilación, la fosforilación y la formación de enlaces isopeptídicos; las mutaciones en SAMHD1 están relacionadas con el síndrome de Aicardi-Goutières, una interferonopatía de tipo I.
• SAMHD1 también potencia la hipermutación de inmunoglobulinas en los linfocitos B al promover mutaciones por transversión (por similitud).

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 527-626 de SAMHD1 humano, una región que contiene el sitio de fosforilación regulador Thr-592. Los usuarios deben tener en cuenta el estado de fosforilación de SAMHD1 en su sistema experimental, ya que puede influir en la unión del anticuerpo; se recomienda la validación en tipos celulares relevantes o bajo estímulos específicos.
• Para Western blot (WB), el peso molecular previsto es de 72 kDa. Utilice condiciones de desnaturalización adecuadas e incluya controles positivos (por ejemplo, lisados de THP-1, HeLa o bazo) para confirmar la especificidad de la banda.
• Para inmunohistoquímica en parafina (IHC-P), probablemente sea necesaria la recuperación antigénica (mediada por calor o enzimática). Realice pruebas en tejidos con expresión conocida de SAMHD1 (por ejemplo, bazo e hígado) e incluya controles de isotipo.
• Para ELISA, el anticuerpo puede utilizarse como reactivo de captura o de detección; se recomienda una combinación adecuada y optimizar la concentración. Realice una validación cruzada con la fuente de antígeno prevista.
• Dadas las funciones de SAMHD1 en la defensa antiviral y la respuesta al daño del ADN, los investigadores pueden evaluar su expresión tras la estimulación con interferón o el estrés replicativo.

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