Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-SARS-CoV-2 NSP12 para WB, ELISA - P0DTD1

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la NSP12 del SARS-CoV-2

• La NSP12 es la ARN polimerasa dirigida por ARN (RdRp) que cataliza la transcripción de los ARN genómicos y subgenómicos virales, esencial para la replicación del SARS-CoV-2. Referencias relacionadas: PMID:32277040 PMID:32358203 PMID:32438371
• Junto con las proteínas accesorias nsp7 y nsp8, la NSP12 forma un complejo de replicación altamente procesivo necesario para la síntesis eficiente de ARN. Referencias relacionadas: PMID:32277040 PMID:32358203 PMID:32438371
• El dominio NiRAN, similar a una quinasa, de la NSP12, une uno o más nucleótidos al extremo N-terminal de la NSP9, creando un iniciador covalente ARN-proteína para el inicio de la transcripción. Referencias relacionadas: PMID:37794589
• La NSP12 ejecuta la transcripción discontinua pausándose en las secuencias reguladoras de la transcripción (TRS) y saltando a la TRS líder, lo que lleva a la producción de ARNm subgenómicos. Referencias relacionadas: PMID:35706445
• La NSP12 es una subunidad de la enzima de caperuza del ARN viral y cataliza la reacción de guanililtransferasa formando la estructura central de la caperuza GpppA-ARN, crucial para la estabilidad del ARNm y la evasión inmune. Referencias relacionadas: PMID:35944563
• Subcelularmente, la NSP12 se localiza predominantemente en el citoplasma del huésped y es reclutada hacia vesículas de doble membrana y complejos de replicación perinucleares derivados del retículo endoplásmico.
• Como actor central en la replicación del coronavirus, la NSP12 es el objetivo de importantes fármacos antivirales como el remdesivir y el molnupiravir.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para Western blotting, tenga en cuenta que el anticuerpo puede detectar tanto el precursor de la poliproteína replicasa completa (~794 kDa) como la NSP12 madura después del procesamiento proteolítico. Es recomendable validar la detección en lisados de células infectadas con SARS-CoV-2 o en sistemas que expresen NSP12 recombinante.
• En aplicaciones de ELISA, la naturaleza policlonal puede mejorar la sensibilidad; sin embargo, se debe descartar la reactividad cruzada con proteínas no relacionadas u otros coronavirus utilizando controles adecuados.
• Dado que el inmunógeno es un péptido sintético (aminoácidos 200–300 de la NSP12), confirme que el epítopo permanece accesible bajo sus condiciones de ensayo (desnaturalizado vs. nativo).
• Para la detección intracelular por inmunofluorescencia, considere que la NSP12 está asociada con complejos de replicación viral en las membranas del huésped; la fijación/permeabilización puede necesitar optimización.

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