Anticuerpo policlonal de conejo anti-SARS-CoV-2 NSP15 para WB, ELISA - P0DTD1

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NSP15

• NSP15 está codificada por el gen rep del SARS-CoV-2 como parte de la gran poliproteína ORF1ab (también conocida como poliproteína replicasa 1ab), que se procesa proteolíticamente en múltiples proteínas no estructurales (NSP) esenciales para el ciclo de vida viral.
• NSP15 funciona como una endorribonucleasa específica de uridilato (EndoU) que juega un papel fundamental en la transcripción y replicación viral al degradar los 5'-poliuridinas generadas durante la replicación de la región poli(A) de los ARN genómicos y subgenómicos virales. Esta actividad evita la acumulación de ARN poli(U) que de otro modo se hibridaría con las colas poli(A) y activaría los sensores de ARNdc del huésped, evitando así la detección inmune innata. Referencias relacionadas: PMID:33504779 PMID:33564093
• La actividad endonucleasa de NSP15 evita la activación simultánea de los sensores de ARNdc de la célula huésped, incluidos MDA5/IFIH1, OAS y PKR, facilitando la evasión inmune.
• Se ha demostrado que NSP15 se une al ARNdc genómico en asociación con el complejo de replicación-transcripción (RTC) y también puede contribuir a la transcripción discontinua por nsp12. Referencias relacionadas: PMID:34562452 PMID:35706445
• NSP15 cataliza una reacción de dos pasos: transesterificación 2'-O generando un fosfato cíclico 2',3', seguido de hidrólisis a un 3'-fosfato. Referencias relacionadas: PMID:33504779 PMID:33564093
• Como componente de la poliproteína replicasa, NSP15 se localiza en los orgánulos de replicación citoplasmáticos del huésped, incluidas vesículas de doble membrana derivadas del retículo endoplásmico, donde ocurre la síntesis de ARN viral (por similitud, basado en palabras clave de localización de poliproteínas).
• La proteína NSP15 está conservada entre los coronavirus y se considera un objetivo antiviral atractivo debido a sus funciones en la replicación viral y la evasión inmune.

Orientación Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido sintético dentro de la región NSP15 (aminoácidos 6600-6700 de YP_009724389.1); por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca NSP15, pero también puede detectar la poliproteína ORF1ab no procesada en lisados de células infectadas. Para Western blot (WB), considere usar lisados de células infectadas con SARS-CoV-2 y valide el patrón de bandas con controles apropiados.
• Para ELISA, inmovilice la proteína NSP15 recombinante o el péptido inmunizante, y optimice las condiciones de recubrimiento y las diluciones de anticuerpos. Dado que este es un anticuerpo policlonal, se debe verificar la consistencia entre lotes.
• No se ha probado la reactividad cruzada con otros coronavirus o proteínas del huésped; valide en su sistema experimental específico si es necesario.

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