Anticuerpo policlonal de conejo anti-SARS-CoV-2 NSP16 para WB, ELISA - P0DTD1

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NSP16

• NSP16 es el dominio 2'-O-metiltransferasa de la poliproteína 1ab de la replicasa del SARS-CoV-2, responsable de metilar la estructura de capucha 5' de los ARNm virales. Referencias relacionadas: PMID:35944563
• La actividad de metilación es crucial para la evasión inmune, permitiendo que los ARNm virales eviten el reconocimiento por los factores de restricción del huésped IFIT1 e IFIT3. Referencias relacionadas: PMID:35944563 PMID:36722972 PMID:36285486
• NSP16 requiere una capucha de guanosina N7-metilada en el sustrato de ARNm para su unión y actividad enzimática. Referencias relacionadas: PMID:35944563
• También puede interferir con el empalme del ARNm del huésped al interactuar con los dominios de reconocimiento de pre-ARNm de los snARN U1 y U2 en el núcleo. Referencias relacionadas: PMID:33080218
• Su localización subcelular incluye el citoplasma del huésped, la región perinuclear y el núcleo, consistente con sus funciones en la replicación viral y la manipulación del huésped.
• Como parte del complejo de replicación-transcripción viral, NSP16 es esencial para la producción de ARNm virales maduros y competentes para la traducción.
• La poliproteína es procesada por proteasas virales en 16 proteínas no estructurales; NSP16 constituye el dominio C-terminal.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 236–290 de NSP16, una región que puede estar expuesta en condiciones desnaturalizantes, lo que respalda su uso en Western blot.
• Valide el anticuerpo en lisados de células infectadas con SARS-CoV-2 o en proteína NSP16 recombinante para confirmar su especificidad.
• Para ELISA, considere emparejarlo con un anticuerpo de captura o detección adecuado; realice una titulación para optimizar las relaciones señal/ruido.
• Dado que el peso molecular predicho de NSP16 es de aproximadamente 33 kDa, confirme el tamaño de la banda observada bajo condiciones experimentales, teniendo en cuenta posibles modificaciones postraduccionales o intermediarios de procesamiento.
• Incluya controles positivos y negativos apropiados para distinguir la señal específica del fondo.

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