Anticuerpo policlonal de conejo anti-NSP2 de SARS-CoV-2 para WB y ELISA - P0DTD1

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la NSP2 de SARS-CoV-2

• La NSP2 es una proteína no estructural procesada a partir de la poliproteína replicasa 1ab (ORF1ab) del SARS-CoV-2, un gran precursor multifuncional involucrado en la transcripción y replicación viral.
• La NSP2 potencia la represión de ARNm del huésped por el complejo 4EHP-GYF2, inhibiendo así las respuestas antivirales y facilitando la replicación viral. Esta actividad se produce en cooperación con la NSP1, que induce el retardo de ribosomas en los transcriptos del huésped.
• La NSP2 se localiza principalmente en el citoplasma del huésped y está asociada a los complejos de replicación viral que se forman en las vesículas de doble membrana derivadas del retículo endoplásmico.
• A diferencia de muchas otras proteínas no estructurales, la NSP2 no cuenta con dominios enzimáticos conocidos; su papel en el antagonismo de la respuesta inmune del huésped parece depender de interacciones proteína-proteína, en particular a través de la modulación de la vía 4EHP-GYF2.
• La poliproteína también genera otras enzimas esenciales: la papaína-lasa proteasa (nsp3) que corta la NSP2 del precursor, la proteasa principal (nsp5) y la ARN polimerasa dependiente de ARN (nsp12).

Guía experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se obtuvo frente a un péptido sintético que abarca los residuos 150–250 de la NSP2. En Western blot, se predice que la proteína NSP2 madura migra alrededor de ~71 kDa; sin embargo, la poliproteína replicasa de longitud completa (794 kDa) también puede ser visible si el procesamiento es incompleto. Valide las bandas detectadas usando controles adecuados (por ejemplo, lisados de células infectadas con SARS-CoV-2 frente a muestras control sin infección).
• Para ELISA, considere recubrir con proteína NSP2 recombinante o lisado viral. Realice experimentos de titulación para determinar las diluciones de trabajo óptimas.
• La reactividad cruzada está confirmada frente a SARS-CoV-2; se recomienda realizar pruebas frente a otros coronavirus o homólogos de NSP2 relacionados para evaluar posibles efectos fuera de objetivo.

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