Anticuerpo policlonal anti-dominio de unión al receptor (RBD) de la proteína Spike del SARS-CoV-2 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P0DTC2

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Glicoproteína Spike

• La glicoproteína de la espícula (S) es una proteína precursora de fusión que media la entrada viral al unirse al receptor celular ACE2 y desencadenar la fusión de membranas. Referencias relacionadas: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• Tras su escisión, la subunidad S2 expone péptidos de fusión para la fusión directa de la membrana celular; alternativamente, la proteína S no escindida conduce a la endocitosis y fusión a través de vías endosomales. Referencias relacionadas: PMID:34561887, PMID:32075877, PMID:32221306
• Los receptores celulares alternativos incluyen NRP1/NRP2, integrinas y ASGR1, permitiendo la entrada independiente de ACE2 y contribuyendo al tropismo tisular. Referencias relacionadas: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• La proteína S es escindida por las proteasas celulares TMPRSS2 o catepsina L (CSTL) durante la entrada, desencadenando cambios conformacionales irreversibles. Referencias relacionadas: PMID:32703818, PMID:34159616
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación, enlaces disulfuro y palmitoilación, que son críticas para la estructura y la función.
• Localización subcelular: membrana del virión, membrana del compartimento intermedio ER-Golgi del huésped y membrana de la célula huésped.
• Contiene un dominio de unión al receptor (RBD) dentro de la subunidad S1 que interactúa directamente con ACE2, convirtiéndolo en un objetivo clave para anticuerpos neutralizantes.
• Puede actuar como un superantígeno e inhibir las respuestas inmunitarias innatas del huésped, contribuyendo a la inmunoevasión viral.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca el dominio de unión al receptor (aa 332-550) de la proteína spike del SARS-CoV-2, lo que hace que este anticuerpo sea adecuado para detectar el RBD en ensayos como transferencia Western (WB), ELISA e inmunoprecipitación (IP).
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), considere validar el anticuerpo en líneas celulares infectadas o células transfectadas con la proteína spike bajo condiciones apropiadas de fijación y permeabilización.
• Al ser un anticuerpo policlonal, puede reconocer múltiples epítopos en el RBD; realice titulación e incluya controles adecuados (por ejemplo, lisados celulares negativos, controles de isotipo) para garantizar la especificidad.
• Se reporta reactividad cruzada para SARS-CoV-2; la reactividad con otros coronavirus o variantes debe confirmarse experimentalmente.
• El peso molecular predicho de la proteína spike de longitud completa es de aproximadamente 141 kDa; sin embargo, las formas escindidas o glicosiladas pueden migrar de manera diferente; considere incluir un control positivo.

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