Anticuerpo Policlonico de Conejo Anti-Spike S1 del SARS-CoV-2 para WB y ELISA - P59594

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Glicoproteína Spike (S1)

• Identidad proteica: La glicoproteína spike del SARS-CoV, también conocida como E2 o proteína peplómera, es una proteína de fusión viral de clase I de 139 kDa esencial para la entrada del virus.
• Adhesión y entrada: La subunidad S1 media la adhesión a los receptores de la célula huésped (por ejemplo, la ACE2 humana y CLEC4M/DC-SIGNR), iniciando la infección y la posterior internalización del virus en los endosomas.
• Fusión: Después de la endocitosis, la proteólisis mediada por la catepsina CTSL desenmascara el péptido de fusión en S2, lo que conduce a la fusión de membranas entre la partícula viral y las membranas celulares del huésped.
• Mecanismo fusogénico: La proteína pasa por al menos tres estados conformacionales: nativo pre-fusión, intermediario pre-horquilla y horquilla post-fusión, donde las regiones de bobina enrollada forman una estructura de trímero de horquillas para impulsar la aposición de membranas.
• Péptido de fusión viral: Una región corta dentro de S2, expuesta después de la escisión, se inserta directamente en las membranas del huésped para promover la fusión.
• Evasión inmunitaria: Regula a la baja la tetherin huésped (BST2) mediante degradación lisosomal para contrarrestar la actividad antiviral.
• Localización subcelular: Se presenta en la membrana de la partícula viral, la membrana del compartimento intermedio retículo endoplásmico-aparato de Golgi del huésped y la membrana celular del huésped; se clasifica como proteína de envoltura viral y proteína de hélice transmembranal.
• Modificaciones clave: Glicoproteína con enlaces disulfuro, palmitoilación (lipoproteína) y un péptido señal; sus características estructurales incluyen dominios de bobina enrollada esenciales para la fusión.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 1–100 del extremo N-terminal de la subunidad S1; la población de anticuerpos resultante puede reconocer epitopos lineales dentro de esta región, incluidos posibles sitios de glicosilación.
• Para la transferencia Western, considere utilizar condiciones reductoras y no reductoras para evaluar el impacto de los enlaces disulfuro en la disponibilidad de epitopos, y valide con lisados de células infectadas por SARS-CoV o proteína spike recombinante.
• En aplicaciones de ELISA, la naturaleza policlonal proporciona avidez; pruebe ambos formatos, directo y de captura, e incluya antígenos de control apropiados (por ejemplo, S1 recombinante, trímero de S) para confirmar la especificidad.
• La reactividad cruzada reportada con el SARS-CoV sugiere un posible reconocimiento amplio entre coronavirus relacionados; puede ser necesaria una validación adicional con variantes de la proteína spike del SARS-CoV-2.

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