Anticuerpo policlonal de conejo anti-Spike S1 del SARS-CoV-2 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P0DTC2

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Spike S1 del SARS-CoV-2

• La glicoproteína de espiga (S) del SARS-CoV-2 media la entrada viral al unirse al receptor del huésped ACE2 (PubMed:32142651, PubMed:32155444, PubMed:33607086) y desencadenar la fusión de membranas. Referencias relacionadas: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• Se sintetiza como precursor y se escinde en las subunidades S1 y S2; S1 contiene el dominio de unión al receptor, mientras que S2 media la fusión (PubMed:34561887). Referencias relacionadas: PMID:34561887
• La entrada viral puede ocurrir mediante fusión directa en la membrana celular tras el clivaje de S2' por TMPRSS2, o mediante endocitosis facilitada por catepsina L (CSTL) (PubMed:32075877, PubMed:32221306, PubMed:32703818, PubMed:34159616). Referencias relacionadas: PMID:32075877, PMID:32221306, PMID:32703818, PMID:34159616
• Los receptores alternativos incluyen NRP1/NRP2 (PubMed:33082294, PubMed:33082293), integrinas (PubMed:35150743) y ASGR1 (PubMed:34837059), lo que puede explicar el tropismo por el epitelio olfatorio (PubMed:33082293). Referencias relacionadas: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• La proteína S es una proteína de fusión viral de clase I que sufre cambios conformacionales irreversibles desde estados de pre-fusión a post-fusión, impulsados por la formación de una estructura de bobina enrollada de repetición heptádica (PubMed:34561887). Referencias relacionadas: PMID:34561887
• La localización subcelular incluye la membrana del virión, la membrana del compartimento intermedio del retículo endoplásmico-Golgi del huésped y la membrana celular del huésped.
• La proteína está fuertemente glicosilada, contiene enlaces disulfuro y está palmitoilada, con un peso molecular de ~141 kDa.
• Las palabras clave destacan roles en la unión viral, fusión de membranas, evasión inmune y actividad de superantígeno.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 11–682 dentro del dominio N-terminal de la subunidad S1; por lo tanto, este anticuerpo es adecuado para detectar la subunidad S1 o la espiga de longitud completa en condiciones de Western blot desnaturalizante/reductor. Espere una banda a ~141 kDa para la espiga de longitud completa, con posibles bandas inferiores que representen S1 (~75–80 kDa) tras el clivaje.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), considere optimizar las condiciones de permeabilización ya que la proteína de espiga transita a través del ER-Golgi y se localiza en la membrana plasmática.
• Este anticuerpo ha sido validado para aplicaciones de inmunoprecipitación (IP); confirme la compatibilidad con su tampón de lisis y los niveles de expresión del objetivo.
• En ELISA, considere emparejarlo con un anticuerpo específico de S2 para diferenciar la espiga de longitud completa de la S1 liberada, lo cual es relevante en el desarrollo de ensayos de diagnóstico.
• Siempre valide el anticuerpo en el sistema de muestra relevante (por ejemplo, células infectadas con SARS-CoV-2, células transfectadas con espiga o proteína recombinante) e incluya los controles apropiados.

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