Policlonal Anti-RBD de Spike de SARS-CoV para WB, ELISA - P59594

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del RBD de Spike de SARS-CoV

• La glicoproteína Spike de SARS-CoV (también conocida como E2 o proteína peplómera) está codificada por el gen S y es esencial para la entrada del virus en las células huésped.
• Mediata la adsorción viral al unirse a los receptores huésped: la enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2) y CLEC4M/DC-SIGNR, desencadenando la internalización del virión en endosomas.
• Tras la unión al receptor y la activación proteolítica por catepsinas huésped, la proteína Spike actúa como proteína de fusión viral de clase I, impulsando la fusión entre las membranas viral y de la célula huésped.
• El dominio de unión al receptor (RBD), ubicado en la subunidad S1, es responsable directamente de la interacción con ACE2 y es un objetivo principal para anticuerpos neutralizantes.
• La proteína también presenta funciones inmunomoduladoras, como la regulación negativa de la tetherina huésped (BST2) mediante degradación lisosomal para contrarrestar las respuestas inmunes innatas antivirales.
• A nivel subcelular, la glicoproteína Spike se localiza en la membrana del virión, el compartimiento intermedio de retículo endoplásmico y Golgi (ERGIC) de la célula huésped y la membrana de la célula huésped.
• Está extensamente modificada postraduccionalmente, con glicosilación, enlaces disulfuro y palmitoilación, que son críticos para su estructura y función.
• Palabras clave adicionales: inmunoevasión viral, inhibición de la respuesta inmune innata huésped y factor de virulencia.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 350-450 del RBD de Spike (según la accesión NP_828851.1); tenga en cuenta esta región de epitopo al diseñar ensayos de detección.
• Este anticuerpo policlonal es adecuado para aplicaciones de Western blot (WB) y ELISA; los usuarios deben optimizar los factores de dilución y validar el rendimiento en sus matrices de muestra específicas.
• Debido a la reactividad cruzada observada con SARS-CoV, el anticuerpo también puede reconocer proteínas Spike de cepas estrechamente relacionadas, pero la reactividad con otros coronavirus debe evaluarse experimentalmente.
• Para la detección por WB, el peso molecular predicho de la glicoproteína Spike de longitud completa es aproximadamente 139 kDa, pero se pueden observar productos de escisión o bandas de degradación dependiendo de la preparación de la muestra.
• En ELISA, el emparejamiento de este anticuerpo con un anticuerpo de captura adecuado o una estrategia de recubrimiento de antígeno dirigida al RBD puede mejorar la sensibilidad del ensayo; se recomienda realizar valoraciones preliminares en tablero de ajedrez.

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