Anticuerpo Policlonado de Conejo Anti-SEC61B para WB, IF/ICC, ELISA - P60468

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de SEC61B

• SEC61B codifica la subunidad beta del complejo translocón SEC61, un componente central de la maquinaria de translocación de proteínas del retículo endoplásmico (RE). Referencias relacionadas: PMID:12475939
• El complejo SEC61 forma un receptor de ribosomas y un poro controlado en la membrana del RE, lo que permite la importación cotraduccional de polipéptidos precursores que contienen péptido señal. Referencias relacionadas: PMID:12475939
• Además, media la inserción en la membrana del RE de proteínas transmembrana, trabajando en conjunto con el complejo translocón de múltiples pasos (MPT) para proteínas de membrana multi dominio transmembrana. Referencias relacionadas: PMID:32820719, PMID:36261522
• SEC61B coopera con la proteína translocadora TRAM1 para facilitar la importación de proteínas nascientes al RE. Referencias relacionadas: PMID:19121997
• A nivel subcelular, SEC61B es un componente integral de la membrana del retículo endoplásmico.
• La proteína sufre varias modificaciones postraduccionales, entre ellas acetilación, palmitoilación y fosforilación, que pueden regular su actividad o estabilidad.
• Como actor clave en la translocación de proteínas, SEC61B está asociado a procesos como el transporte de proteínas, la translocación y la organización de la membrana del RE.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para Western Blot (WB), el peso molecular predicho de SEC61B es de aproximadamente 10 kDa. Utiliza un gel SDS-PAGE al 12-15% y optimiza la transferencia a una membrana de PVDF con tamaño de poro de 0,2 µm para proteínas pequeñas. Incluye controles positivos adecuados (por ejemplo, lisados de tejido o líneas celulares HeLa, HEK293 que expresen SEC61B) y valida la especificidad del anticuerpo con un péptido de bloqueo o una muestra knockout.
• Para Inmunofluorescencia/Inmunocitoquímica (IF/ICC), se recomienda la fijación con PFA al 4% seguida de permeabilización con Tritón X-100 al 0,1%. Prueba la concentración del anticuerpo en el rango de 1:50–1:200 y confirma su localización en el RE. La cotinción con un marcador de RE (por ejemplo, calnexina o PDI) puede ayudar a verificar la especificidad.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede evaluar como reactivo de captura o detección. Titula el anticuerpo para determinar la concentración de trabajo óptima y valídalo con una proteína recombinante de SEC61B o lisado celular. Asegúrate de realizar pruebas de reactividad cruzada con muestras de ratón y rata para confirmar el rendimiento.
• Como anticuerpo policlonado, se debe monitorear la consistencia entre lotes. Considera alicuotarlo al recibirlo y realizar un estudio piloto para cada nuevo lote para mantener la reproducibilidad experimental.

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