Anticuerpo policlonal de conejo anti-SERCA2/ATP2A2 para WB, IHC-P - P16615

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de SERCA2/ATP2A2

• La ATPasa 2 de calcio del retículo sarcoplásmico/endoplásmico (SERCA2), también conocida como bomba de calcio 2, está codificada por el gen ATP2A2 y pertenece a la familia de ATPasas transportadoras de cationes de tipo P. El corte y empalme alternativo genera múltiples isoformas con expresión específica de cada tejido.
• SERCA2 es una enzima dependiente de magnesio que cataliza la hidrólisis de ATP acoplada a la translocación de iones de calcio desde el citosol hacia la luz del retículo sarcoplásmico o endoplásmico, lo que resulta esencial para la homeostasis intracelular del calcio. Referencias relacionadas: PMID:12542527 PMID:16402920
• Esta bomba desempeña un papel clave en el ciclo de contracción/relajación de las células musculares al regular la recaptación de calcio en el retículo sarcoplásmico.
• Además de su función muscular, SERCA2 participa en la autofagia: mediante su interacción con VMP1, controla los contactos entre las membranas de aislamiento del RE necesarios para la formación del autofagosoma y modula los contactos con las gotas lipídicas, las mitocondrias y los endosomas. Referencias relacionadas: PMID:28890335
• En los osteoclastos, SERCA2 actúa como regulador de la señalización del calcio mediada por TNFSF11 mediante su interacción con TMEM64, promoviendo la activación de NFATC1 y la generación de especies reactivas de oxígeno mitocondriales, procesos fundamentales para la diferenciación de los osteoclastos.
• A nivel subcelular, SERCA2 se localiza en la membrana del retículo endoplásmico y en la membrana del retículo sarcoplásmico, lo que refleja su función en el almacenamiento y la señalización del calcio intracelular.
• La expresión en los tejidos varía: la isoforma 1 se expresa ampliamente en el músculo liso y en tejidos no musculares (con niveles altos en el hígado, el páncreas y los pulmones), mientras que las isoformas 2 y 3 se encuentran predominantemente en el músculo cardíaco y en el músculo esquelético de contracción lenta.
• Las principales modificaciones postraduccionales incluyen la unión de nucleótidos, la fosforilación y los enlaces disulfuro; la proteína también está sujeta a nitración, como indican múltiples estudios fosfoproteómicos.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo policlonal se generó contra un fragmento recombinante que abarca los aminoácidos 111-253 de SERCA2/ATP2A2 humano (región conservada). Puede reconocer múltiples isoformas y presentar reactividad cruzada con SERCA2 de ratón y rata, según se ha confirmado.
• Para Western blot, se espera una banda de aproximadamente 115 kDa. Optimice las condiciones reductoras/no reductoras y considere utilizar controles de carga procedentes de tejidos con alta expresión de SERCA2 (por ejemplo, hígado y corazón).
• Para inmunohistoquímica (secciones de parafina), emplee métodos adecuados de recuperación antigénica y valide la tinción en tejidos que expresen SERCA2. Incluya controles tisulares positivos y negativos.
• Para aplicaciones de ELISA, utilice el inmunógeno recombinante o la proteína purificada como antígeno de recubrimiento. Verifique las condiciones de recubrimiento y las series de dilución del anticuerpo.
• Como ocurre con cualquier anticuerpo policlonal, se debe verificar la consistencia entre lotes para los ensayos cuantitativos. Considere realizar experimentos piloto al cambiar de lote.

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