Anticuerpo Policlonal Anti-SETD3 para WB, IP, ELISA - Q86TU7

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de SETD3

• SETD3, también conocido como hSETD3 o C14orf154, es una proteína 3 que contiene un dominio SET codificada por el gen SETD3.
• SETD3 es una actina-histidina N-metiltransferasa que metila específicamente la actina en la histidina-73 (His-73) para formar 3-metilhistidina (tele-metilhistidina). Esta actividad es crítica para una dinámica adecuada de la actina. Referencias relacionadas: PMID:30526847, PMID:30626964, PMID:30785395
• La metilación de histidina de la actina por SETD3 es necesaria para la contracción del músculo liso, particularmente en el útero en trabajo de parto durante el parto, destacando su papel en los procesos fisiológicos. Referencias relacionadas: PMID:30626964
• La enzima exhibe una estricta especificidad de sustrato; no posee actividad proteína-lisina N-metiltransferasa y probablemente solo metila la actina en His-73, subrayando su nicho funcional único. Referencias relacionadas: PMID:30626964, PMID:30785395, PMID:31388018
• SETD3 se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, lo que sugiere posibles funciones específicas del compartimiento más allá de la metilación de la actina.
• La proteína está sujeta a splicing alternativo, fosforilación y conjugación de ubiquitina, y contiene un dominio SET que se une a S-adenosil-L-metionina, el donante de metilo para su actividad de transferasa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado para este anticuerpo es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 72–329 de SETD3 humano. Esta región cubre la porción N-terminal y parte del dominio SET; por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca SETD3 de longitud completa (peso molecular predicho ~67 kDa).
• Para la transferencia Western (Western blotting, WB), es recomendable ejecutar lisados de control positivos y negativos apropiados (por ejemplo, líneas celulares que expresan SETD3 frente a knockdown) para confirmar la especificidad. Se espera la detección de una banda a ~67 kDa en muestras humanas.
• En ensayos de inmunoprecipitación (IP), puede ser necesario optimizar la concentración de anticuerpo y el tiempo de incubación; un punto de partida estándar es de 1–2 µg por cada 500 µg de lisado.
• Al realizar ELISA, considere usar proteína SETD3 recombinante o fragmentos de péptidos como antígenos de recubrimiento y titular el anticuerpo para una relación óptima de señal-ruido.
• Dado que se indica reactividad cruzada para humano, la validación en otras especies debe realizarse de forma independiente si es necesario.

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