Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-SETDB1 (Validado por KO) para WB, IF-P, ELISA - Q15047

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de SETDB1

• SETDB1, también conocido como ESET o KMT1E, es una histona-lisina N-metiltransferasaasa que trimetila específicamente la lisina 9 de la histona H3 (H3K9me3), una característica distintiva de la represión transcripcional. Referencias relacionadas: PMID:11959841, PMID:12869583, PMID:14536086
• Funciona principalmente en la eucromatina para silenciar genes, acoplando H3K9me3 con la metilación del ADN a través de interacciones con MBD1 y ATF7IP, y esta represión se mantiene de manera heredable durante la replicación del ADN mediante CAF-1. Referencias relacionadas: PMID:12869583, PMID:14536086, PMID:27237050
• SETDB1 es reclutado a la cromatina por TRIM28/KAP1, el cual es dirigido por proteínas de dedo de zinc KRAB, y es esencial para la formación de heterocromatina mediada por HUSH y el silenciamiento génico. Referencias relacionadas: PMID:24623306, PMID:27732843
• En las células madre embrionarias, SETDB1 mantiene la represión de genes y retrovirus endógenos, cooperando con TRIM28 para la deposición de H3K9me3 de manera independiente a la metilación del ADN. Referencias relacionadas: PMID:24623306, PMID:37938770
• SETDB1 también cataliza la mono- y dimetilación de H3K9 en el citoplasma sobre histonas libres antes del ensamblaje de la cromatina. Referencias relacionadas: PMID:26405197
• Se localiza predominantemente en el núcleo, pero también se encuentra en el citoplasma y se asocia con los cromosomas.
• Una isoforma con empalme alternativo carece de dominios clave de metiltransferasa y es catalíticamente inactiva.
• Se expresa ampliamente con los niveles más altos en testículos.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aminoácidos 1–397); el anticuerpo puede reconocer la proteína SETDB1 de longitud completa (~143 kDa) y posiblemente fragmentos N-terminales.
• La validación por KO sugiere una alta especificidad; los investigadores deben incluir controles de knockout o knockdown en su configuración experimental para confirmar la especificidad en sus propios sistemas.
• Para la transferencia Western (Western blotting), use un rango de marcadores de peso molecular alto y considere tiempos de transferencia largos o geles de bajo porcentaje para la proteína de 143 kDa.
• Para inmunofluorescencia/IF-P, optimice los protocolos de fijación y permeabilización para detectar SETDB1 nuclear/cromosómico.
• En ELISA, verifique la reactividad cruzada si utiliza especies distintas a humano, ratón o rata.

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