Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-SF3A3 para WB, ELISA - Q12874

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de SF3A3

• SF3A3 (Subunidad 3 del Factor de Empalme 3A), también conocido como SF3a60, SAP61, PRP9 o PRPF9, es un componente de 59 kDa del subcomplejo SF3A dentro de la ribonucleoproteína nuclear pequeña U2 (snRNP) del espliceosoma (UniProt Q12874).

• Juega un papel central en el empalme de pre-ARNm como parte del complejo 17S U2 SnRNP, el cual participa directamente en el ensamblaje temprano del espliceosoma al reconocer el sitio de ramificación del intrón y promover la selección de la adenosina del sitio de ramificación, el nucleófilo para el primer paso de transesterificación. Referencias relacionadas: PMID:10882114, PMID:11533230, PMID:32494006

• SF3A3 contribuye a la formación del complejo E del pre-espliceosoma y del complejo A del espliceosoma pre-catalítico, y permanece asociado a través de la formación de los complejos B del espliceosoma pre-catalítico. Referencias relacionadas: PMID:10882114, PMID:11533230, PMID:29360106, PMID:30315277

• A nivel subcelular, SF3A3 se localiza en las manchas nucleares (speckles) y el nucleoplasma, lo cual es consistente con su función en el almacenamiento de factores de empalme y los sitios de transcripción activa.

• La proteína se expresa de forma ubicua en los tejidos y está sujeta a modificaciones postraduccionales, incluyendo fosforilación y acetilación, según lo identificado por estudios de proteómica.

• SF3A3 contiene dominios de dedo de zinc y coordina iones de zinc, lo que indica funciones de unión a metales que pueden estabilizar la estructura de la proteína o mediar interacciones dentro del espliceosoma.

• El complejo SF3A, compuesto por SF3A1, SF3A2 y SF3A3, es esencial para el reclutamiento de la snRNP U2 y su asociación estable con el pre-ARNm; las deficiencias en SF3A3 alteran la fidelidad del empalme y pueden dar lugar a transcritos aberrantes.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que corresponde a la región N-terminal (aa 1-100) del SF3A3 humano. Para la transferencia Western (Western blotting), se espera una banda específica cercana a 59 kDa; recomendamos usar extractos nucleares o lisados celulares totales de líneas celulares humanas (p. ej., HeLa, HEK293) o de ratón. Se aconsebla la prevalidación del anticuerpo en el sistema de muestra relevante.

• Para aplicaciones de ELISA, el péptido inmunógeno puede usarse como antígeno de recubrimiento; sin embargo, la detección de SF3A3 nativo en muestras complejas puede requerir optimización. Considere el emparejamiento con un anticuerpo de detección que se dirija a un epítopo no superpuesto.

• Se ha reportado reactividad cruzada para humano y ratón; confirme la reactividad en otras especies si es necesario, ya que la homología de secuencia varía.

• Use controles negativos apropiados (p. ej., knockdown por siRNA) para verificar la especificidad en su contexto experimental.

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