Anticuerpo Policlonal Anti-SHC4 para WB, IF/ICC, ELISA - Q6S5L8

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de SHC4

• La proteína transformadora SHC4 (SHC4), también conocida como RaLP o hShcD, es un miembro de la familia de proteínas adaptadoras SHC. Contiene un dominio SH2 y un dominio de unión a fosfotirosina, que median las interacciones con receptores de tirosina cinasa activados y efectores aguas abajo.
• SHC4 activa vías de migración dependientes e independientes de Ras en melanomas, contribuyendo a la invasión y metástasis de las células tumorales.
• Participa en las fases iniciales de la fosforilación de tirosina inducida por agrina de CHRNB1 (subunidad β1 del receptor de acetilcolina) en la membrana postsináptica, vinculando las señales de la matriz extracelular con la agrupación de receptores sinápticos.
• SHC4 se localiza en la membrana celular postsináptica, lo cual es consistente con su función en la señalización sináptica y la migración del melanoma.
• La expresión tisular está muy restringida: SHC4 solo se expresa en melanomas, con una expresión débil en melanocitos normales y nevos benignos. Su expresión aumenta fuertemente durante la transición de la fase de crecimiento radial a la vertical y en melanomas metastásicos, correlacionándose con la adquisición de competencia migratoria e invasiva.
• La proteína sufre splicing alternativo y está regulada por fosforilación, lo cual modula sus funciones de adaptador.
• El peso molecular de SHC4 es de aproximadamente 69 kDa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno, fragmento recombinante N-terminal (aa 1-185), puede detectar múltiples isoformas de SHC4 resultantes del splicing alternativo. Considere ejecutar un marcador de peso molecular de rango completo para identificar las bandas principales.
• Para Western blot, se espera una banda prominente cerca de 69 kDa en líneas celulares de melanoma; valide la especificidad del anticuerpo utilizando muestras de control positivas y negativas debido a la expresión restringida.
• En inmunofluorescencia o ICC, anticipe una localización en la membrana o sináptica; la tinción simultánea con marcadores de membrana puede confirmar la especificidad.
• La reactividad cruzada reportada con ratón sugiere utilidad en modelos murinos, pero se debe evaluar la homología; pruebe en su sistema de muestra para verificar la reactividad.
• Los ensayos ELISA pueden requerir una titulación cuidadosa del antígeno de recubrimiento y la concentración del anticuerpo; considere el formato de ELISA indirecto para la detección.
• Para todas las aplicaciones, confirme la especificidad de la banda y la relación señal/ruido utilizando condiciones de bloqueo y lavado apropiadas; los resultados no óptimos pueden necesitar titulación del anticuerpo o pasos de recuperación de antígeno.

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