Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-SLC12A1 para WB, ELISA - Q13621

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de SLC12A1

• SLC12A1 codifica el cotransportador Na-K-2Cl específico del riñón (NKCC2), un miembro de la familia de transportadores de solutos 12, que media el simporte electroneutro de iones sodio, potasio y cloruro a través de la membrana apical de la rama ascendente gruesa (RAG) del asa de Henle. Referencias relacionadas: PMID:21321328
• NKCC2 es esencial para la reabsorción transepitelial de NaCl en la RAG, impulsando la concentración y regulación del volumen urinario; sirve como el objetivo principal de los diuréticos de asa como la bumetanida.
• El transportador puede sustituir funcionalmente el amonio (NH4+) por potasio, facilitando la secreción apical de NH4+ en la RAG medular, un proceso crítico para la homeostasis del amonio renal durante la acidosis metabólica.
• La expresión de SLC12A1 es altamente específica del riñón, con la localización de la proteína restringida a la membrana plasmática apical de las células en las ramas ascendentes gruesas corticales y medulares.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación N-ligada y fosforilación, que regulan el tráfico y la actividad del transportador en respuesta a la vasopresina y otras señales hormonales.
• Las mutaciones en SLC12A1 causan el síndrome de Bartter tipo 1, un trastorno renal con pérdida de sal caracterizado por alcalosis hipopotasémica, hipercalciuria y poliuria, subrayando el papel crítico de NKCC2 en el equilibrio electrolítico.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a los residuos 50–150 de SLC12A1 humano. Verifique la conservación del epítopo si utiliza muestras no humanas, aunque se reporta reactividad cruzada con ratón y rata.
• Para Western blot de NKCC2 (PM predicho ~121 kDa), considere usar un gel de poliacrilamida de bajo porcentaje (ej. 6–8%) y tiempos de transferencia prolongados para asegurar una transferencia eficiente de esta gran proteína de membrana glicosilada.
• Incluya inhibidores de fosfatasas en los tampones de lisis y considere el tratamiento con fosfatasa para resolver desplazamientos de bandas dependientes de fosforilación, ya que NKCC2 está regulado por fosforilación en respuesta a hormonas.
• Para aplicaciones de ELISA, un diseño de ensayo competitivo con el péptido inmunizante o un formato de captura usando un fragmento de dominio extracelular recombinante podría ser adecuado; optimice el tampón de recubrimiento y las condiciones de bloqueo para minimizar la unión inespecífica.

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